Sledování exprese zánětlivých faktorů během navození stafylokokové kožní infekce u prasat

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00027162%3A_____%2F22%3AN0000187" target="_blank" >RIV/00027162:_____/22:N0000187 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

<a href="https://www.csaki.cz/odborne-akce/xxxix-sjezd-ceskych-a-slovenskych-alergologu-a-klinickych-imunologu-164" target="_blank" >https://www.csaki.cz/odborne-akce/xxxix-sjezd-ceskych-a-slovenskych-alergologu-a-klinickych-imunologu-164</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Sledování exprese zánětlivých faktorů během navození stafylokokové kožní infekce u prasat

Popis výsledku v původním jazyce

Bakteriální infekce kůže a měkkých tkání jsou celosvětově hojně rozšířené a často jsou způsobeny bakterií Staphylococcus aureus. MRSA (methicilin rezistentní S. aureus) patří mezi nebezpečné původce nosokomiálních nákaz. Předmětem této studie bylo pomocí qRT-PCR sledování exprese genů prozánětlivých faktorů během experimentálního navození prasečího modelu kožní infekce S. aureus. Na zádech každého prasete bylo chirurgicky vytvořeno deset defektů o velikosti 5x5 cm. Rány byly infikovány bakterií S. aureus. Vzorky tkání každého bakteriálního kmene byly hodnoceny 4., 8., 11. a 15. den po infekci. Z každé rány byl odebrán vzorek a ihned ponořen do RNA lateru. Následovala izolace RNA z tkáňových homogenátů. Genová exprese vybraných genů byla kvantifikována pomocí real-time PCR. Pro sledování reakce imunitního systému byla stanovena exprese těchto genů: IL-1β, IL-8, TIMP1, MMP1, TGFβ. V kontrolních tkáních (před zahájením infekce) byla naměřena minimální exprese vybraných genů. Již třetí den po infekci se exprese všech genů zvýšila. IL-8 přispívá k lokálnímu hojení ran pro svou schopnost podporovat migraci a proliferaci keratinocytů. Jeho exprese byla zvýšena zejména čtvrtý a osmý den po infekci. Prozánětlivý cytokin IL-1β byl zvýšen třetí den po infekci, následně jeho exprese klesala. Byla také zaznamenána zvýšená exprese matricové metaloproteinázy-1 (MMP1) degradující kolagen, stejně tak její inhibitor TIMP1. V průběhu experimentu byla zaznamenána postupně se zvyšující exprese genu pro transformující růstový faktor β1 (TGF-β1), jež antagonizuje odpověď lymfocytů, inhibuje prozánětlivé cytokiny a slouží jako signál k vypnutí imunitní odpovědi. Mikrobiologická analýza otisků ran prokázala přítomnost S. aureus po celou dobu průběhu experimentu. Zároveň byla prokázána zvýšená exprese genů prozánětlivých faktorů ve tkáni infikovaných ran. Vzhledem k narůstající rezistenci bakterií vůči antibiotikům je potřeba hledat nové léčivé látky. Protože zatím neexistuje relevantní infekční model, tento model má potenciál pro využití k testování účinnosti nových antimikrobiálních látek proti MRSA přímo na kůži (in vivo).

Název v anglickém jazyce

Monitoring of expression of inflammatory factors during the induction of staphylococcal skin infection in pigs

Popis výsledku anglicky

Bacterial skin and soft tissue infections are widespread worldwide and are often caused by the bacterium Staphylococcus aureus. MRSA (methicillin-resistant S. aureus) is among the dangerous agents of nosocomial infections. The subject of this study was to use qRT-PCR to monitor the expression of genes of pro-inflammatory factors during the experimental induction of a pig model of S. aureus skin infection. Ten 5x5 cm defects were surgically created on the back of each pig. The wounds were infected with S. aureus bacteria. Tissue samples of each bacterial strain were evaluated on days 4, 8, 11, and 15 post-infection. A sample was taken from each wound and immediately immersed in RNA later. This was followed by isolation of RNA from tissue homogenates. Gene expression of selected genes was quantified using real-time PCR. To monitor the response of the immune system, the expression of the following genes was determined: IL-1β, IL-8, TIMP1, MMP1, TGFβ. The minimum expression of selected genes was measured in control tissues (before infection). As early as the third day after infection, the expression of all genes increased. IL-8 contributes to local wound healing due to its ability to promote keratinocyte migration and proliferation. Its expression was increased especially on the fourth and eighth day after infection. The pro-inflammatory cytokine IL-1β was increased on the third day after infection, then its expression decreased. Increased expression of the collagen-degrading matrix metalloproteinase-1 (MMP1) was also noted, as was its inhibitor TIMP1. During the experiment, a gradually increasing expression of the gene for transforming growth factor β1 (TGF-β1) was recorded, which antagonizes the response of lymphocytes, inhibits pro-inflammatory cytokines and serves as a signal to turn off the immune response. Microbiological analysis of wound impressions demonstrated the presence of S. aureus throughout the duration of the experiment. At the same time, increased expression of genes of pro-inflammatory factors in the tissue of infected wounds was demonstrated. Due to the increasing resistance of bacteria to antibiotics, there is a need to search for new medicinal substances. As there is no relevant infection model yet, this model has the potential to be used to test the efficacy of new antimicrobials against MRSA directly on the skin (in vivo)

Druh

O - Ostatní výsledky

CEP obor

—

OECD FORD obor

30303 - Infectious Diseases

Projekt

<a href="/cs/project/NV19-05-00214" target="_blank" >NV19-05-00214: Studium terapeutické aplikace antibakteriálního krytí rány pro infekce kůže a měkkých tkání u epidemiologicky relevantních kmenů S. aureus - rezistentních na meticilin.</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2022

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů