Termostabilní endolysin a kódující sekvence

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00027162%3A_____%2F22%3AN0000224" target="_blank" >RIV/00027162:_____/22:N0000224 - isvavai.cz</a>

Nalezeny alternativní kódy

RIV/61989100:27730/16:86096256

Výsledek na webu

<a href="https://isdv.upv.cz/webapp/resdb.print_detail.det?pspis=PUV/40347&plang=CS" target="_blank" >https://isdv.upv.cz/webapp/resdb.print_detail.det?pspis=PUV/40347&plang=CS</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Termostabilní endolysin a kódující sekvence

Popis výsledku v původním jazyce

Technické řešení poskytuje genový konstrukt obsahující kódující sekvenci termostabilní varianty bakteriofágového ensolysinu F1 s dvěma bodovými mutacemi. Konstrukt obsahuje kódující sekvenci ubikvitinu Ub3, sekvenci kódující 14 His-Tag, sekvencí kódující štěpné místo pro TEV proteázu a nukleotidovou sekvencí kódující termostabilní variantu lytické endopeptidázy T72P_G124P (LYSDERM T2) s optimalizovaným použitím kodonů pro E. coli. Termostabilní varianta endopeptidázy T72P_G124P byla navržena s využitím energetického a evolučního výpočetního přístupu stabilizace proteinů. Sekvence obsahuje dvě bodové mutace: T72P (prolin za threonin) v katalytické doméně a G124P (prolin za glycin) ve vazebné doméně. Bylo navrženo 15 potenciálně stabilizujících jednobodových mutací lytické endopeptidázy. Po verifikaci jednobodových mutací bylo navrženo a experimentálně ověřeno pět dvoubodových mutací, z nichž varianta lytické endopeptidázy T72P_G124P vykazuje zlepšení teplotní stability enzymu o 3,38 °C.

Název v anglickém jazyce

Thermostable endolysin and coding sequence

Popis výsledku anglicky

The invention provides a gene construct including a coding sequence for a thermostable variant of bacteriophage ensolysin F1 with two point mutations. The construct contains the Ub3 ubiquitin coding sequence, the 14 His-Tag coding sequence, the TEV protease cleavage site coding sequence and the nucleotide sequence encoding the thermostable variant of the lytic endopeptidase T72P-G124P (LYSDERM T2) with optimized codon usage for E. coli. The thermostable variant of lytic endopeptidase T72P_G124P was designed using an energetic and evolutionary computational approach to protein stabilization. The sequence contains two point mutations T72P (proline for threonin) in the catalytic domain and G124P (prolin for glycin) in the binding domain. 15 potentially stabilizing single point mutations of the lytic endopeptidase have been proposed. The single point mutations were verified and then five two-point mutations were designed and experimentally verified. The β-lytic endopeptidase variant T72P_G124P shows an improvement in the thermal stability of the enzyme by 3.38 °C.

Druh

F_uzit - Užitný vzor

CEP obor

—

OECD FORD obor

10608 - Biochemistry and molecular biology

Projekt

<a href="/cs/project/NV19-05-00214" target="_blank" >NV19-05-00214: Studium terapeutické aplikace antibakteriálního krytí rány pro infekce kůže a měkkých tkání u epidemiologicky relevantních kmenů S. aureus - rezistentních na meticilin.</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2022

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Číslo patentu nebo vzoru

36714

Vydavatel

CZ001 -

Název vydavatele

Industrial Property Office

Místo vydání

Prague

Stát vydání

CZ - Česká republika

Datum přijetí

—

Název vlastníka

Výzkumný ústav veterinárního lékařství, v. v. i., Brno, Medlánky

Způsob využití

A - Výsledek využívá pouze poskytovatel

Druh možnosti využití

A - K využití výsledku jiným subjektem je vždy nutné nabytí licence