Membránový test pro stanovení specifického ovlivnění aktivity jednotlivých izoforem lidských adenylátcykláz citlivých na forskolin

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00159816%3A_____%2F18%3A00070403" target="_blank" >RIV/00159816:_____/18:00070403 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Membránový test pro stanovení specifického ovlivnění aktivity jednotlivých izoforem lidských adenylátcykláz citlivých na forskolin

Popis výsledku v původním jazyce

Cílem tohoto funkčního vzorku bylo zavést a validovat komplexní test pro analýzu ovlivnění aktivity specifických lidských membránově vázaných izoforem enzymu adenylátcykláz (AC 1-8). V lidském organismu bylo do této doby identifikováno 8 izoforem AC, které jsou aktivovatelné přírodní sloučeninou forskolinem, a které se vzájemně liší tkáňovou distribucí a možností regulace. Výzkum nových izoformově-specifických modulátorů naznačuje, že se AC mohou stát zajímavým přímým terapeutickým cílem léčiv nové generace. Cílené testování látek napříč jednotlivými izoformami tak umožní selekci a řízenou syntézu látek, které budou vysoce specifické vůči jednotlivým izoformám AC. Vyvinutá metodologie využívá membránové frakce izolované z unikátních klonů buněk HEK293 (human embryonic kidney cells 293), které selektivně exprimují vybranou izoformu AC. Bylo vyvinuto osm klonů buněk HEK293, z nichž každý klon obsahuje odlišný specifický plazmid kódující izoformu AC 1 až 8. Analýza ovlivnění aktivity jednotlivých membránově vázaných izoforem AC je detekována pomocí měření produkce cAMP metodou homogenní kompetitivní imunoanalýzy využívající k detekci Försterův rezonanční přenos energie s časovým rozlišením (TR-FRET). Metodika byla validována a byla provedena analýza opakovatelnosti (intra-assay variability a inter-assay variability).

Název v anglickém jazyce

Membrane assay for determination of modulation of activity of particular forskolin-sensitive human adenylate cyclases

Popis výsledku anglicky

The aim of this functional sample was to introduce and validate a comprehensive assay to analyze the activity of specific human membrane-bound adenylate cyclase isoforms (AC 1-8). To date, eight AC isoforms have been identified in the human body that are activatable by the natural compound forskolin and which differ in tissue distribution and regulation. Research related to new AC isoform-specific modulators suggests that AC can become an interesting therapeutic target for next generation of drugs. Thus, targeted screening of substances across single isoforms will enable selection and controlled synthesis of substances that will be highly specific to individual AC isoforms. The developed methodology utilizes membrane fractions isolated from unique human embryonic kidney cells 293 (HEK293) clones that selectively express the selected AC isoform. Eight HEK293 cell clones were developed, each clone containing a different specific plasmid encoding the AC 1 to 8 isoform. (TR-FRET). The methodology was validated and an intra-assay variability and inter-assay variability analysis was performed.

Druh

G_funk - Funkční vzorek

CEP obor

—

OECD FORD obor

10608 - Biochemistry and molecular biology

Projekt

<a href="/cs/project/TG02010048" target="_blank" >TG02010048: Podpora ověřování a komercializace výsledků výzkumu a vývoje ve Fakultní nemocnici u Sv. Anny v Brně</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2018

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Interní identifikační kód produktu

16_2018_FV

Číselná identifikace

Není k dispozici

Technické parametry

Výsledek byl uplatněn po ověření vlastností unikátního laboratorního zařízení - assay.

Ekonomické parametry

FV slouží zatím k výzkumným účelům. Nyní nedochází k přímému prodeji vzorku. Případné vyčíslení prodejní ceny vychází z nákladu na vývoj, výrobu, materiál a přiměřený zisk.

Kategorie aplik. výsledku dle nákladů

—

IČO vlastníka výsledku

00159816

Název vlastníka

Fakultní nemocnice u sv. Anny v Brně

Stát vlastníka

CZ - Česká republika

Druh možnosti využití

V - Výsledek je využíván vlastníkem

Požadavek na licenční poplatek

Z - Poskytovatel licence na výsledek nepožaduje v některých případech licenční poplatek

Adresa www stránky s výsledkem

—