Nový koncept přípravy referenčních materiálů s heterozygotním genotypem pro molekulárně diagnostické účely

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00179906%3A_____%2F14%3A10282921" target="_blank" >RIV/00179906:_____/14:10282921 - isvavai.cz</a>

Nalezeny alternativní kódy

RIV/00216208:11150/14:10282921

Výsledek na webu

<a href="http://www.chemicke-listy.cz/docs/full/2014_09_882-885.pdf" target="_blank" >http://www.chemicke-listy.cz/docs/full/2014_09_882-885.pdf</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Nový koncept přípravy referenčních materiálů s heterozygotním genotypem pro molekulárně diagnostické účely

Popis výsledku v původním jazyce

Za použití technologie genové syntézy jsme připravili referenční materiál s genotypem složeného heterozygota pro analýzu mutací G20210A v genu pro faktor II a G1691A v genu pro faktor V krevního srážení. Připravený klon obsahoval fragmenty DNA odpovídající zdravým (wild-type) i mutovaným sekvencím obou genů. Mutované fragmenty byly do klonovacího vektoru vloženy v invertované orientaci vůči fragmentům se sekvencí wild-type. Oboustranným sekvenováním a metodou alelické diskriminace založené na real-timePCR byl u připraveného klonu potvrzen genotyp složeného heterozygota pro mutace G20210A a G1691A. Námi navržený postup vytvoření heterozygotního referenčního materiálu je jednou z možností, jak získat kontrolní vzorky pro vyšetření jakéhokoliv bialelického polymorfního místa s řídce se vyskytujícími minoritními variantami.

Název v anglickém jazyce

A New Concept in Preparation of Reference Materials with Heterozygous Genotype for Molecular Diagnostic Purposes

Popis výsledku anglicky

Using the technique of enzymatic gene assembly we developed a compound heterozygous reference material for analysis of G20210A mutation in the Factor II and G1691A in the Factor V genes. The prepared clone contained both wild-type and mutant fragments ofthe genes. The DNA fragments carrying the mutations were inserted into the cloning vector in the inverse orientation relative to the wild-type ones. The clone performance was verified by DNA sequencing and by the allele discrimination realtime PCR methods. Our novel approach makes it possible to prepare a compound heterozygous reference material for any rare variants at biallelic polymorphic sites if analyzed by real-time PCR or other methods.

Druh

J_x - Nezařazeno - Článek v odborném periodiku (Jimp, Jsc a Jost)

CEP obor

EB - Genetika a molekulární biologie

OECD FORD obor

—

Projekt

—

Návaznosti

I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Rok uplatnění

2014

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název periodika

Chemické listy

ISSN

0009-2770

e-ISSN

—

Svazek periodika

108

Číslo periodika v rámci svazku

9

Stát vydavatele periodika

CZ - Česká republika

Počet stran výsledku

4

Strana od-do

882-885

Kód UT WoS článku

000344829000009

EID výsledku v databázi Scopus

—