C-peptid ovlivňuje hladinu glyoxalázy 1 v proximálních tubulárních buňkách in vitro

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216224%3A14110%2F20%3A00118625" target="_blank" >RIV/00216224:14110/20:00118625 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

C-peptid ovlivňuje hladinu glyoxalázy 1 v proximálních tubulárních buňkách in vitro

Popis výsledku v původním jazyce

Úvod: Diabetické onemocnění ledvin (DKD) je nejčastější příčinou konečného stádia chronického selhání ledvin (end-stage renal disease, ESRD). Léčebná strategie k zastavení progrese DKD je výborná kompenzace základního onemocnění, kontrola krevního tlaku a lipidů a dalších metabolických parametrů. Nicméně ani striktní dodržování léčebných opatření nemusí vést k zastavení progrese do ESRD. Za jednu z protektivních drah je považován glyoxalázový systém s enzymem glyoxalázou 1 (GLO-1), jehož funkcí je odstraňování reaktivního aldehydu methylglyoxalu, který vzniká při glykolýze a uplatňuje se při vzniku DKD. V poslední době se také uvažuje o úloze C-peptidu v patogenezi DKD. C-peptid, který byl dlouhou dobu považován za biologicky inertní molekulu, prokázal v řadě studií své příznivé účinky jak na molekulární, tak i orgánové úrovni. Zvyšuje aktivitu i expresi vícera antioxidačních molekul, ve studiích na zvířatech a limitovaném počtu lidí vedl ke zlepšení parametrů renálních funkcí. Cílem in vitro experimentu bylo sledovat vliv C-peptidu na GLO-1. Metodika: Exprese GLO-1 byla sledována na imortalizované linii epitelových buněk proximálního tubulu HK-2. Buňky byly kultivovány v základním kultivačním médiu (DMEM + Hams F-12) za čtyř typů podmínek – normoglykémie (NG), normoglykémie + C-peptid (NGC), hyperglykémie (HG) a hyperglykémie + C-peptid (HGC). Normoglykémii odpovídala koncentrace glukózy v kultivačním médiu 7,2 mmol/l a hyperglykémii 25 mmol/l. Koncentrace C-peptidu byla v obou případech 1 nmol/l. Po kultivaci byly z buněk izolovány proteiny, kvantifikovány pomocí Westernblottingu a vztaženy k BETA-aktinu. Výsledky: C-peptid v HG médiu snížil expresi GLO-1 vůči NG (p &lt; 0,01) a NGC (p = 0,03). Patrný je i rozdíl mezi HG a HGC, ale není statisticky signifikantní (p = 0,06). Závěr: C-peptid ve fyziologické koncentraci 1 nmol/l snižuje expresi GLO-1 v hyperglykemických podmínkách u HK-2 buněk. Nabízí se vysvětlení, že při hyperglykémii C-peptid omezuje množstvo glukózy vstupující do glykolýzy nebo methylglyoxal eliminuje jiným způsobem. K zodpovězení této otázky je potřebný další výzkum.

Název v anglickém jazyce

C-peptide affects the level of glyoxalase 1 in proximal tubular cells in vitro

Popis výsledku anglicky

Introduction: Diabetic kidney disease (HDD) is the most common cause of end-stage renal disease (ESRD). The treatment strategy to stop the progression of DKD is an excellent compensation for the underlying disease, controlling blood pressure and lipids and other metabolic parameters. However, even strict adherence to treatment measures may not lead to halting progression to the ESRD. One of the protective pathways is considered to be the glyoxalase system with the enzyme glyoxalase 1 (GLO-1), the function of which is the removal of the reactive aldehyde methylglyoxal, which is formed during glycolysis and is used in the formation of DKD. Recently, the role of C-peptide in the pathogenesis of DKD has also been considered. C-peptide, which has long been considered a biologically inert molecule, has shown beneficial effects in a number of studies at both the molecular and organ levels. It increases the activity and expression of several antioxidant molecules, in animal studies and in a limited number of people has led to improved parameters of renal function. The aim of the in vitro experiment was to monitor the effect of C-peptide on GLO-1. Methods: GLO-1 expression was monitored on an immortalized epithelial cell line of the proximal tubule HK-2. Cells were cultured in basic culture medium (DMEM + Hams F-12) under four types of conditions - normoglycemia (NG), normoglycemia + C-peptide (NGC), hyperglycemia (HG) and hyperglycemia + C-peptide (HGC). The glucose concentration in the culture medium was 7.2 mmol / l and the hyperglycemia was 25 mmol / l. The C-peptide concentration was 1 nmol / l in both cases. After culturing, proteins were isolated from the cells, quantified by Western blotting and related to BETA-actin. Results: C-peptide in HG medium decreased GLO-1 expression against NG (p &amp; lt; 0.01) and NGC (p = 0.03). The difference between HG and HGC is also noticeable, but it is not statistically significant (p = 0.06). Conclusion: C-peptide at a physiological concentration of 1 nmol / l reduces GLO-1 expression under hyperglycemic conditions in HK-2 cells. An explanation is offered that in hyperglycemia, C-peptide reduces the amount of glucose entering glycolysis or otherwise eliminates methylglyoxal. Further research is needed to answer this question.

Druh

O - Ostatní výsledky

CEP obor

—

OECD FORD obor

30109 - Pathology

Projekt

<a href="/cs/project/NV18-01-00046" target="_blank" >NV18-01-00046: Genetické skóre v predikci rizika diabetu a jeho komplikací</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2020

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů