Detekce proteinových biomarkerů pomocí lateral flow testů s foton-upkonverzními nanočásticemi

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216224%3A14310%2F22%3A00129216" target="_blank" >RIV/00216224:14310/22:00129216 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

<a href="http://www.ccsss.cz/index.php/ccsss/issue/view/35/59" target="_blank" >http://www.ccsss.cz/index.php/ccsss/issue/view/35/59</a>

DOI - Digital Object Identifier

<a href="http://dx.doi.org/10.54779/ccsss20220335" target="_blank" >10.54779/ccsss20220335</a>

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Detekce proteinových biomarkerů pomocí lateral flow testů s foton-upkonverzními nanočásticemi

Popis výsledku v původním jazyce

S využitím konjugátů UCNPs se podařilo optimalizovat LFIA stanovení pro detekci HSA. Pro analýzu byla využita specifická anti-HSA protilátka a kontrolní anti-myší protilátka. Jako vhodný pufr pro imobilizaci protilátek byl zvolen acetátový pufr s přídavkem 1% methanolu. Pro výsledné vyhodnocení analýzy bylo potřeba zajistit vhodné podmínky pro inkubaci a uvolnění konjugátu UCNPs ze skleněné membrány, zde se jako nejlepší kombinace ukázalo využití skleněné membrány ST17 a Tris pufru s 5% sacharosou. Volba odlišné nitrocelulosové membrány pak měla na vývoj imunostanovení relativně malý vliv, nejvýhodnější se ukázalo použití membrány 120 HP Plus Thick. S optimalizovanými podmínkami LFIA došlo ke snížení pozadí analýzy a dostatečné odezvě signálu, což ukazuje na potenciál využití UCNPs jako alternativní značky v LFIA stanoveních. Dále byla úspěšně demonstrována schopnost detegovat HSA, a proto bude dalším krokem analýza reálných vzorků obsahujících různé koncentrace HSA, aby byl ověřen praktický potenciál metody pro klinické účely.

Název v anglickém jazyce

Detection of protein biomarkers using lateral flow tests with photon-upconversion nanoparticles

Popis výsledku anglicky

Rapid and sensitive detection of clinically important analytes is crucial for early disease diagnosis and initiation of treatment. Immunochemical assays are widely used to determine the presence and concentration of analytes in various complex media due to their high specificity provided by antibodies. Recently, lateral flow immunoassays (LFIAs) are becoming one of the most popular forms of immunochemical assays. LFIAs are test strips based on nitrocellulose membranes, and their most significant advantage is that there is no need for laboratory equipment to perform the assay enabling their use for point-of-care testing. Most LFIAs are based on gold nanoparticles; however, they often limit the resulting sensitivity of LFIAs. Our work focused on photon-upconversion nanoparticles (UCNPs) as a sensitive alternative label. UCNPs are lanthanide-based nanocrystals exhibiting anti-Stokes luminescence (excitation by the NIR laser and detection in the Vis region), which allows detection without optical background interference. We have developed an LFIA assay for human serum albumin (HSA) with UCNPs as a label. Using a specific anti-HSA antibody and a control anti-mouse antibody, various LFIA parameters were optimized. The immobilization of antibodies was done using acetate buffer with 1% methanol, glass membrane ST17 was used as a conjugate pad, and Tris buffer with 5% sucrose was used to stabilize the particles within the conjugate pad. The choice of a different nitrocellulose membrane had a relatively small effect on assay performance; the best results were achieved with membrane 120 HP Plus Thick. Our work has successfully demonstrated the potential of using UCNPs as sensitive labels in LFIA tests.

Druh

D - Stať ve sborníku

CEP obor

—

OECD FORD obor

10406 - Analytical chemistry

Projekt

<a href="/cs/project/GA21-03156S" target="_blank" >GA21-03156S: Foton-upkonverzní značky pro mikrofluidní jednomolekulové imunostanovení proteinových biomarkerů</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2022

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název statě ve sborníku

Czech Chem. Soc. Symp. Ser. 20, 335–339 (2022)

ISBN

—

ISSN

2336-7202

e-ISSN

2336-7210

Počet stran výsledku

5

Strana od-do

335-339

Název nakladatele

Czech Chemical Society Symposium Series

Místo vydání

Praha

Místo konání akce

Brno

Datum konání akce

1. 1. 2022

Typ akce podle státní příslušnosti

CST - Celostátní akce

Kód UT WoS článku

—