METODIKA PRO ON-LINE STANOVENÍ PHB

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F24166855%3A_____%2F18%3AN0000002" target="_blank" >RIV/24166855:_____/18:N0000002 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

METODIKA PRO ON-LINE STANOVENÍ PHB

Popis výsledku v původním jazyce

Původní metoda stanovení PHB pomocí GC-FID je založená na methanolýze PHB a následném stanovení ve formě metylesterů metodou vnitřního standardu po vysušení vzorku. Inovativním krokem referenční metody je stanovení PHB online z důvodu monitorování probíhajícího procesu fermentace. Metoda GC-FID byla ve firmě Nafigate Corporation a.s. používána do 31.3.2018 kdy byla nahrazena online metodou FT-NIR z důvodu dosažení okamžitého výsledku biosyntézy PHB v přijatelné přesnosti stanovení.

Název v anglickém jazyce

Method for on-line determination of PHB

Popis výsledku anglicky

Original method of PHB determination by GC-FID is based on methanolysis of PHB and subsequent determination of methylesters with internal standard. Innovative step of the method is ability to determine PHB on-line in order to monitor fermentation run. The GC-FID method was used till the end of March 2018 when was replaced by on-line method in desired accuracy.

Druh

N_metC - Metodiky certifikované oprávněným orgánem

CEP obor

—

OECD FORD obor

10700 - Other natural sciences

Projekt

<a href="/cs/project/TF02000062" target="_blank" >TF02000062: Transfer biotechnologie Hydal do Číny</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2018

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Interní identifikační kód produktu

DELTA-05

Číslo předpisu

M047/M/2018

Technické parametry

Metoda stanovení PHB pomocí FT-NIR spektrofotometru je založena na měření absorpčních spekter vzorku v blízké infračervené oblasti (NIR). Absorpce záření vzorkem v NIR je způsobena energetickými přechody mezi vibračními hladinami molekul. Pro měření se využívá imerzní odrazová sonda s vláknovou optikou, která je spojena se spektrofotometrem. Záření z halogenového zdroje bílého světla s vysokou energií přechází děličem paprsků z CaF2 a vláknovou optikou se dostává z přístroje přímo do sondy, která je ponořená ve vzorku. Absorbance záření vzorkem je proměřována v celé oblasti blízkého infračerveného záření. Záření prošlé vzorkem se odrazí na zrcadle, které se nachází na vnitřní straně transflektačního nástavce sondy a vrací se vláknovou optikou zpět do přístroje, kde vstupuje do InGaAs detektoru. Jako referenční laser se používá hélium-neonový laser. Spektrum vzorku v rozsahu 12 000 – 3 800 cm-1 se stanovuje průměrováním 64 skenů, přičemž doba měření je přibližně 90 vteřin. Pro vyhodnocení výsledků měření obsahu PHB ve vzorku se používá chemometrického modelu PLS (partial least squares). Z důvodu, že v blízké infračervené oblasti se nenacházejí izolované pásy, příslušící jednotlivým vibracím skupin typických pro stanovovanou složku, se pro měření vzorku využívá větší část spektra nebo celé spektrum. Pomocí PLS se ze spektra získají informace o obsahu PHB. Chemometrický model metody byl ověřenena na experimentální lince technologie Hydal provozované Nafigate Corporation. Dne 17.7.2018, kde bylo provedeno opakované on-line stanovení obsahu PHB na konci fermentace s průměrným výsledkem 45,63 g/L s maximální absolutní odchylkou 1,05g/L což spadá do stanoveného limitu 5%. Maximální doba stanovení obsahu polymeru od odebrání vzorku byla 6 min. Tj. při třech opakování bylo dosaženo celkového výsledku do 20 min. Tj. ve stanoveném limitu 30min.

Ekonomické parametry

Postup umožní on-line měření obsahu PHB které není možné pomocí ne-online metodami které jsou časově a finančně náročné. Umožní to tak analyzovat polymer PHB levněji o cca 1000kč na jeden vzorek.

Označení certifikačního orgánu

Česká společnost pro jakost

Datum certifikace

—

Způsoby využití výsledku

A - Výsledek využívá pouze poskytovatel