Transformace hrachu s využitím CRISPR/Cas9 za účelem vytvoření nízkofytátových linií

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F26784246%3A_____%2F22%3AN0000010" target="_blank" >RIV/26784246:_____/22:N0000010 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

<a href="https://www.vupt.cz/storage/app/media/Avanti/sbornik2022.pdf" target="_blank" >https://www.vupt.cz/storage/app/media/Avanti/sbornik2022.pdf</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Transformace hrachu s využitím CRISPR/Cas9 za účelem vytvoření nízkofytátových linií

Popis výsledku v původním jazyce

Práce popisuje tvorbu a použití vektorových konstruktů obsahujících expresní kazetu pro CRISPR/Cas9 pro transformaci hrachu setého (Pisum sativum L.) za účelem získání nízkofytátových linií. Cílem pro transformaci byl gen pro myo-inositol 3 fosfát syntázu (mips), který má klíčovou roli v syntéze kyseliny fytové. Byly vytvořeny 3 různé konstruky s cílem dosáhnout indukované mutace v tomto genu. Konstrukty byly následně použity pro agrobakteriální transformaci nodálních segmentů z naklíčených semen hrachu, zahrnujících axilární meristémy. Z regenerantů rostoucích na selekčních médiích byly odebírány vzorky pro PCR detekci selekčního genu a oblasti virG a současně pro detekci indukované mutace prostřednictvím metody PCR a následné restrikce. Podařilo se prokázat vznik transformovaných rostlin obsahujících reportérový gen uidA, nicméně doposud nebyl zachycen vzorek s úspěšně indukovanou mutací.

Název v anglickém jazyce

Pea transformation with the use of CRISPR/Cas9 for the creation of low-phytic pea lines

Popis výsledku anglicky

This work describes the creation and use of vector constructs containing an expression cassette for CRISPR/Cas9 for the transformation of pea (Pisum sativum L.) in order to obtain low phytate lines. The target for transformation was the gene for myo-inositol 3 phosphate synthase (mips), which plays a key role in the synthesis of phytic acid. 3 different constructs were developed and used to induce mutations in the mips gene in peas. These constructs were used for agrobacterial transformation of pea nodal explants. Samples were taken from the regenerants growing on the selection media for PCR detection of the selection gene and the virG region and at the same time for detection of the induced mutation by the PCR method and subsequent restriction. The emergence of transformed plants containing the uidA reporter gene has been demonstrated, however, a sample with a successfully induced mutation has not been captured yet.

Druh

J_ost - Ostatní články v recenzovaných periodicích

CEP obor

—

OECD FORD obor

40402 - GM technology (crops and livestock), livestock cloning, marker assisted selection, diagnostics (DNA chips and biosensing devices for the early/accurate detection of diseases) biomass feedstock production technologies, biopharming

Projekt

<a href="/cs/project/QK1810072" target="_blank" >QK1810072: Vývoj biofortifikovaných linií hrachu se sníženým obsahem kyseliny fytové</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Rok uplatnění

2022

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název periodika

Úroda – vědecká příloha časopisu

ISSN

0139-6013

e-ISSN

—

Svazek periodika

LXX

Číslo periodika v rámci svazku

12

Stát vydavatele periodika

CZ - Česká republika

Počet stran výsledku

8

Strana od-do

83–90

Kód UT WoS článku

—

EID výsledku v databázi Scopus

—