DNA konstrukt pro produkci rekombinatní alergenních komponenty

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F27093123%3A_____%2F19%3AN0000001" target="_blank" >RIV/27093123:_____/19:N0000001 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

<a href="http://www.apronex.cz/OPPIK_Aplikace_I" target="_blank" >http://www.apronex.cz/OPPIK_Aplikace_I</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

DNA konstrukt pro produkci rekombinatní alergenních komponenty

Popis výsledku v původním jazyce

Technologie se skládá z materiálu – specifické sekvence DNA a ověřeného postupu pro výrobu vysoce purifikované rekombinantní molekuly dominantního příčinného alergenu.

Název v anglickém jazyce

DNA construct for the production of recombinant allergens components

Popis výsledku anglicky

The respective synthetic coding sequences for the recombinant allergens were cloned into correspondent expression vectors either for the bacterial expression in Escherichia coli or for the expression in insect S2 cells. The expression vectors were transfected into appropriate host cells and tested for the expression of corresponding recombinant allergens. Upon optimization of their expression in the respective expression system, the recombinant allergens were purified and further tested for their functionality in Basophile-activation tests (BAT) run at project partner Exbio. The obtained results were certified by independent analyses and the applied methodical approaches were standardized.

Druh

Z_tech - Ověřená technologie

CEP obor

—

OECD FORD obor

10606 - Microbiology

Projekt

<a href="/cs/project/EG15_019%2F0001057" target="_blank" >EG15_019/0001057: Alergeny pro diagnostiku alergií pomocí funkčních testů</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2019

Kód důvěrnosti údajů

C - Předmět řešení projektu podléhá obchodnímu tajemství (§ 504 Občanského zákoníku), ale název projektu, cíle projektu a u ukončeného nebo zastaveného projektu zhodnocení výsledku řešení projektu (údaje P03, P04, P15, P19, P29, PN8) dodané do CEP, jsou upraveny tak, aby byly zveřejnitelné.

Interní identifikační kód produktu

Rekombinantní alergeny_OPPIK_I

Číselná identifikace

—

Technické parametry

Kódující sekvence všech 20 rekombinantních alergenů (viz Tabulka 1, také na www.apronex.cz/OPPIK_Aplikace_I ) byly komerčně in vitro syntetizovány, klonovány do příslušných expresních vektorů (T7 promotor pro expresi v E. coli a methalothienový MT promotor následovaný BiP signálním peptidem pro sekreční expresi v S2 buňkách). Všechny klonované sekvence byly následně ověřeny pomocí DNA sekvenování. Tyto ověřené expresní vektory byly následně pomocí transformace (E. coli chemo-kompetentní buňky) či transfekce (S2 buňky, Lipofectamine LF3000) vneseny do E.coli BL21 či do Drosophila S2 buněk a buňky obsahující tyto expresní vektory s rekombinantními alergeny byly selektovány pomocí antibiotikové rezistence (ampicilin či kanamycin pro E.coli a blasticidine pro S2 buňky). Rekombinantí proteiny byly buď z buněčných lyzátů (exprese v E.coli) či z kultivačního média (exprese v hmyzích S2 buňkách) purifikovány pomocí standartních chromatografických přístupů (viz Tab. 1 a Standardni operační protokoly_Apronex) a jejich čistota a funkčnost byla ověřena pomocí SDS elektroforézy (Apronex) a BAT testů (Exbio). Prozatím žádná licenční smlouva s jiným komerčním subjektem nebyla uzavřena. V rámci projektové smlouvy jsou tyto rekombinantní alergeny testovány ve firmě Exbio a.s. a probíhá jejich komercializace (samotné rekombinantní alergeny či v rámci kitů – např. BAT kity) na základě obchodního vztahu mezi Apronex s.r.o. a Exbio a.s.

Ekonomické parametry

Rekombinantí alergeny produkované z odpovídajících expresních vektorů se v současnosti začínají komercializovat.

Kategorie aplik. výsledku dle nákladů

—

IČO vlastníka výsledku

27093123

Název vlastníka

Apronex s.r.o.

Stát vlastníka

CZ - Česká republika

Druh možnosti využití

A - K využití výsledku jiným subjektem je vždy nutné nabytí licence

Požadavek na licenční poplatek

A - Poskytovatel licence na výsledek požaduje licenční poplatek

Adresa www stránky s výsledkem

www.apronex.cz/OPPIK_Aplikace_I