Resazurinový test pro hodnocení antimikrobiálních účinků nanovláknitých filtračních membrán

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F28778758%3A_____%2F18%3AN0000023" target="_blank" >RIV/28778758:_____/18:N0000023 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Resazurinový test pro hodnocení antimikrobiálních účinků nanovláknitých filtračních membrán

Popis výsledku v původním jazyce

Adheze mikroorganismů a organické hmoty na membrány vede k tvorbě biofilmů, které snižují tok filtrovaného média přes membránu, a tak zkracují životnost membrány. Z tohoto důvodu je žádoucí eliminovat adhezi a množení mikroorganismů na membráně. Pro zhodnocení antimikrobiálních účinků nových typů nanovláknitých membrán jsme optimalizovali metabolický test, který využívá resazurin jako indikátor množství životaschopných mikroorganismů na vzorcích membrán. Testovány byly membrány funkcionalizované kvarterními amoniovými solemi nebo nanočásticemi stříbra. Membrány byly inkubovány s bakteriálním inokulem v mikrodeskách, poté byl přidán roztok resazurinu a měřena kinetika metabolizace resazurinu na fluoreskující resorufin. Pro vyjádření počtu bakterií namnožených na membráně byla intenzita fluorescence resorufinu přepočtena na množství bakterií (vyjádřeno v kolonie tvořících jednotkách, CFU, na vzorek) pomocí zkonstruované kalibrační křivky. Z této kalibrační křivky byl také určen detekční limit resazurinového testu pro oba druhy testovaných bakterií. Za použití tohoto testu byly zjištěny silné antimikrobiální účinky membrán s imobilizovanými nanočásticemi stříbra, zatímco membrány s kvartérními amoniovými solemi významnou účinnost nevykazovaly. Pro validaci resazurinového testu byly stejné membrány testovány tradiční vytřepávací metodou s následným počítáním CFU na agarových plotnách (dle ISO 20743), a výsledky byly porovnatelné. Prokázali jsme tak jak vhodnost resazurinového testu pro testování porézních materiálů, tak i jeho další výhody, kterými jsou nižší pracnost a výrazné zkrácení doby testování.

Název v anglickém jazyce

Resazurin assay for assessment of antimicrobial properties of nanofibre filtration membranes

Popis výsledku anglicky

Adhesion of microorganisms and organic matter to membranes leads to a biofilm formation, which decreases flow through a membrane and reduces the membrane operation time. Thus, it is of crucial importance to eliminate adhesion and proliferation of microorganisms on/in a membrane. For antimicrobial efficacy assessment of new types of nanofiber membranes, we optimized a metabolic test based on resazurin as indicator of viability of microorganisms grown on membranes. We used membranes functionalized with quarternary ammonium salts or with silver nanoparticles. These membranes were incubated with bacterial inoculum in microplates, resazurin was added and kinetics of resazurin metabolization was measured as relative fluorescence units. To express the number of bacteria on membranes, the relative fluorescence units were converted using the calibration curve to colony forming units (CFU) per sample. The calibration curve is a relation between bacterial amount and speed of resazurin metabolization. The limit of detection was set for both bacterial species used for assessment. Using resazurin assay, a high antimicrobial efficiency of membranes with immobilized silver nanoparticle was observed, while membranes involving quarternary ammonium salt had no significant efficiency. These results were compared with tests using the same membranes were following traditional method including vortexing and CFU counting on agar plates (according to ISO 20743). The results obtained from both methods revealed to be comparable. Therefore, it can be concluded that the suitability of resazurin assay for testing porous materials tests has been proved. Moreover, the resazurin assay was evaluated to be less time-consuming method in contrast to the traditionally used approach.

Druh

D - Stať ve sborníku

CEP obor

—

OECD FORD obor

20501 - Materials engineering

Projekt

<a href="/cs/project/FV10323" target="_blank" >FV10323: Funkční polymery pro aditivaci nanovlákenných filtračních membrán</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2018

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název statě ve sborníku

INOVATIVNÍ SANAČNÍ TECHNOLOGIE VE VÝZKUMU A PRAXI X

ISBN

978-80-88238-09-6

ISSN

—

e-ISSN

—

Počet stran výsledku

6

Strana od-do

30-35

Název nakladatele

CALLISTO-96 s.r.o.

Místo vydání

Pardubice-Semtín

Místo konání akce

Žďár nad Sázavou

Datum konání akce

17. 10. 2018

Typ akce podle státní příslušnosti

CST - Celostátní akce

Kód UT WoS článku

—