The use of TALENs for nonhomologous end joining mutagenesis in silkworm and fruitly

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F60077344%3A_____%2F14%3A00426076" target="_blank" >RIV/60077344:_____/14:00426076 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

<a href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1046202314000449" target="_blank" >http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1046202314000449</a>

DOI - Digital Object Identifier

<a href="http://dx.doi.org/10.1016/j.ymeth.2014.02.014" target="_blank" >10.1016/j.ymeth.2014.02.014</a>

Jazyk výsledku

angličtina

Název v původním jazyce

The use of TALENs for nonhomologous end joining mutagenesis in silkworm and fruitly

Popis výsledku v původním jazyce

Transcription activator-like effector nucleases (TALENs) are custom-made enzymes designed to cut double-stranded DNA at desired locations. The DNA breaks are repaired either by error-prone non-homologous end-joining (NHEJ) pathway or via homologous recombination requiring homologous DNA as a template for the repair. TALENs are used for site-specific mutagenesis in an extended range of organisms including insects. We will describe here a simple TALEN-based mutagenesis protocol suitable for the generationof germline mutations in Bombyx mori and Drosophila melanogaster. The protocol includes assembly of specific TAL modules, in vitro synthesis of TALEN RNAs, egg microinjection and mutation detection using PCR analysis. Our procedure allows a high frequency induction of NHEJ mutations, which often allows the reception of homozygous mutants already in the G1.

Název v anglickém jazyce

The use of TALENs for nonhomologous end joining mutagenesis in silkworm and fruitly

Popis výsledku anglicky

Transcription activator-like effector nucleases (TALENs) are custom-made enzymes designed to cut double-stranded DNA at desired locations. The DNA breaks are repaired either by error-prone non-homologous end-joining (NHEJ) pathway or via homologous recombination requiring homologous DNA as a template for the repair. TALENs are used for site-specific mutagenesis in an extended range of organisms including insects. We will describe here a simple TALEN-based mutagenesis protocol suitable for the generationof germline mutations in Bombyx mori and Drosophila melanogaster. The protocol includes assembly of specific TAL modules, in vitro synthesis of TALEN RNAs, egg microinjection and mutation detection using PCR analysis. Our procedure allows a high frequency induction of NHEJ mutations, which often allows the reception of homozygous mutants already in the G1.

Druh

J_x - Nezařazeno - Článek v odborném periodiku (Jimp, Jsc a Jost)

CEP obor

EB - Genetika a molekulární biologie

OECD FORD obor

—

Projekt

<a href="/cs/project/GAP305%2F10%2F2406" target="_blank" >GAP305/10/2406: Cílená mutageneze u bource morušového</a><br>

Návaznosti

I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Rok uplatnění

2014

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název periodika

Methods

ISSN

1046-2023

e-ISSN

—

Svazek periodika

69

Číslo periodika v rámci svazku

1

Stát vydavatele periodika

US - Spojené státy americké

Počet stran výsledku

12

Strana od-do

46-57

Kód UT WoS článku

000341803500008

EID výsledku v databázi Scopus

—