Vše

Co hledáte?

Vše
Projekty
Výsledky výzkumu
Subjekty

Rychlé hledání

  • Projekty podpořené TA ČR
  • Významné projekty
  • Projekty s nejvyšší státní podporou
  • Aktuálně běžící projekty

Chytré vyhledávání

  • Takto najdu konkrétní +slovo
  • Takto z výsledků -slovo zcela vynechám
  • “Takto můžu najít celou frázi”

The calcium-binding site of human glutamate carboxypeptidase II is critical for dimerization, thermal stability, and enzymatic activity

Identifikátory výsledku

  • Kód výsledku v IS VaVaI

    <a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F61388963%3A_____%2F18%3A00495871" target="_blank" >RIV/61388963:_____/18:00495871 - isvavai.cz</a>

  • Nalezeny alternativní kódy

    RIV/00216208:11310/18:10386439 RIV/86652036:_____/18:00495871

  • Výsledek na webu

    <a href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/pro.3460" target="_blank" >https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/pro.3460</a>

  • DOI - Digital Object Identifier

    <a href="http://dx.doi.org/10.1002/pro.3460" target="_blank" >10.1002/pro.3460</a>

Alternativní jazyky

  • Jazyk výsledku

    angličtina

  • Název v původním jazyce

    The calcium-binding site of human glutamate carboxypeptidase II is critical for dimerization, thermal stability, and enzymatic activity

  • Popis výsledku v původním jazyce

    Calcium ions are required for proper function of a wide spectrum of proteins within cells. X-ray crystallography of human glutamate carboxypeptidase II (GCPII) revealed the presence of a Ca2+-binding site, but its importance for the structure and function of this metallopeptidase has not been elucidated to date. Here, we prepared a panel of mutants targeting residues that form the Ca2+ coordination sphere of GCPII and analyzed their structural and enzymatic properties using an array of complementary biophysical and biochemical approaches. Our data unequivocally show that even a slight disruption of the Ca2+-binding site destabilizes the three-dimensional fold of GCPII and is associated with impaired secretion, a high propensity to form nonphysiological oligomers, and an inability to bind active site-targeted ligands. Additionally, the Ca2+-binding site is critical for maintenance of the native homodimeric quaternary arrangement of GCPII, which is indispensable for its enzymatic activity. Overall, our results offer a clear picture of the importance of Ca2+ for the structural integrity and hydrolytic activity of human GCPII and by extension homologous members of the M28 zinc-dependent metallopeptidase family.

  • Název v anglickém jazyce

    The calcium-binding site of human glutamate carboxypeptidase II is critical for dimerization, thermal stability, and enzymatic activity

  • Popis výsledku anglicky

    Calcium ions are required for proper function of a wide spectrum of proteins within cells. X-ray crystallography of human glutamate carboxypeptidase II (GCPII) revealed the presence of a Ca2+-binding site, but its importance for the structure and function of this metallopeptidase has not been elucidated to date. Here, we prepared a panel of mutants targeting residues that form the Ca2+ coordination sphere of GCPII and analyzed their structural and enzymatic properties using an array of complementary biophysical and biochemical approaches. Our data unequivocally show that even a slight disruption of the Ca2+-binding site destabilizes the three-dimensional fold of GCPII and is associated with impaired secretion, a high propensity to form nonphysiological oligomers, and an inability to bind active site-targeted ligands. Additionally, the Ca2+-binding site is critical for maintenance of the native homodimeric quaternary arrangement of GCPII, which is indispensable for its enzymatic activity. Overall, our results offer a clear picture of the importance of Ca2+ for the structural integrity and hydrolytic activity of human GCPII and by extension homologous members of the M28 zinc-dependent metallopeptidase family.

Klasifikace

  • Druh

    J<sub>imp</sub> - Článek v periodiku v databázi Web of Science

  • CEP obor

  • OECD FORD obor

    10608 - Biochemistry and molecular biology

Návaznosti výsledku

  • Projekt

    Výsledek vznikl pri realizaci vícero projektů. Více informací v záložce Projekty.

  • Návaznosti

    I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Ostatní

  • Rok uplatnění

    2018

  • Kód důvěrnosti údajů

    S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Údaje specifické pro druh výsledku

  • Název periodika

    Protein Science

  • ISSN

    0961-8368

  • e-ISSN

  • Svazek periodika

    27

  • Číslo periodika v rámci svazku

    9

  • Stát vydavatele periodika

    US - Spojené státy americké

  • Počet stran výsledku

    10

  • Strana od-do

    1575-1584

  • Kód UT WoS článku

    000447779000004

  • EID výsledku v databázi Scopus

    2-s2.0-85055040824