Vše

Co hledáte?

Vše
Projekty
Výsledky výzkumu
Subjekty

Rychlé hledání

  • Projekty podpořené TA ČR
  • Významné projekty
  • Projekty s nejvyšší státní podporou
  • Aktuálně běžící projekty

Chytré vyhledávání

  • Takto najdu konkrétní +slovo
  • Takto z výsledků -slovo zcela vynechám
  • “Takto můžu najít celou frázi”

Negative charge of the AC-to-Hly linking segment modulates calcium-dependent membrane activities of Bordetella adenylate cyclase toxin

Identifikátory výsledku

  • Kód výsledku v IS VaVaI

    <a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F61388963%3A_____%2F20%3A00531086" target="_blank" >RIV/61388963:_____/20:00531086 - isvavai.cz</a>

  • Nalezeny alternativní kódy

    RIV/61388971:_____/20:00531086 RIV/00216208:11310/20:10414158

  • Výsledek na webu

    <a href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0005273620301413" target="_blank" >https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0005273620301413</a>

  • DOI - Digital Object Identifier

    <a href="http://dx.doi.org/10.1016/j.bbamem.2020.183310" target="_blank" >10.1016/j.bbamem.2020.183310</a>

Alternativní jazyky

  • Jazyk výsledku

    angličtina

  • Název v původním jazyce

    Negative charge of the AC-to-Hly linking segment modulates calcium-dependent membrane activities of Bordetella adenylate cyclase toxin

  • Popis výsledku v původním jazyce

    Two distinct conformers of the adenylate cyclase toxin (CyaA) appear to accomplish its two parallel activities within target cell membrane. The translocating conformer would deliver the N-terminal adenylyl cyclase (AC) enzyme domain across plasma membrane into cytosol of cells, while the pore precursor conformer would assemble into oligomeric cation-selective pores and permeabilize cellular membrane. Both toxin activities then involve a membrane-interacting 'AC-to-Hly-linking segment' (residues 400 to 500). Here, we report the NMR structure of the corresponding CyaA(411-490) polypeptide in dodecylphosphocholine micelles and show that it consists of two alpha-helices linked by an unrestrained loop. The N-terminal alpha-helix (Gly418 to His439) remained solvent accessible, while the C-terminal alpha-helix (His457 to Phe485) was fully enclosed within detergent micelles. CyaA(411-490) weakly bound Ca2+ ions (apparent K-D 2.6 mM) and permeabilized negatively charged lipid vesicles. At high concentrations (10 mu M) the CyaA(411-490) polypeptide formed stable conductance units in artificial lipid bilayers with applied voltage, suggesting its possible transmembrane orientation in the membrane-inserted toxin. Mutagenesis revealed that two clusters of negatively charged residues within the 'AC-to-Hly-linking segment' (Glu419 to Glu432 and Asp445 to Glu448) regulate the balance between the AC domain translocating and pore-forming capacities of CyaA in function of calcium concentration.

  • Název v anglickém jazyce

    Negative charge of the AC-to-Hly linking segment modulates calcium-dependent membrane activities of Bordetella adenylate cyclase toxin

  • Popis výsledku anglicky

    Two distinct conformers of the adenylate cyclase toxin (CyaA) appear to accomplish its two parallel activities within target cell membrane. The translocating conformer would deliver the N-terminal adenylyl cyclase (AC) enzyme domain across plasma membrane into cytosol of cells, while the pore precursor conformer would assemble into oligomeric cation-selective pores and permeabilize cellular membrane. Both toxin activities then involve a membrane-interacting 'AC-to-Hly-linking segment' (residues 400 to 500). Here, we report the NMR structure of the corresponding CyaA(411-490) polypeptide in dodecylphosphocholine micelles and show that it consists of two alpha-helices linked by an unrestrained loop. The N-terminal alpha-helix (Gly418 to His439) remained solvent accessible, while the C-terminal alpha-helix (His457 to Phe485) was fully enclosed within detergent micelles. CyaA(411-490) weakly bound Ca2+ ions (apparent K-D 2.6 mM) and permeabilized negatively charged lipid vesicles. At high concentrations (10 mu M) the CyaA(411-490) polypeptide formed stable conductance units in artificial lipid bilayers with applied voltage, suggesting its possible transmembrane orientation in the membrane-inserted toxin. Mutagenesis revealed that two clusters of negatively charged residues within the 'AC-to-Hly-linking segment' (Glu419 to Glu432 and Asp445 to Glu448) regulate the balance between the AC domain translocating and pore-forming capacities of CyaA in function of calcium concentration.

Klasifikace

  • Druh

    J<sub>imp</sub> - Článek v periodiku v databázi Web of Science

  • CEP obor

  • OECD FORD obor

    10608 - Biochemistry and molecular biology

Návaznosti výsledku

  • Projekt

    Výsledek vznikl pri realizaci vícero projektů. Více informací v záložce Projekty.

  • Návaznosti

    I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Ostatní

  • Rok uplatnění

    2020

  • Kód důvěrnosti údajů

    S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Údaje specifické pro druh výsledku

  • Název periodika

    Biochimica Et Biophysica Acta-Biomembranes

  • ISSN

    0005-2736

  • e-ISSN

  • Svazek periodika

    1862

  • Číslo periodika v rámci svazku

    9

  • Stát vydavatele periodika

    NL - Nizozemsko

  • Počet stran výsledku

    14

  • Strana od-do

    183310

  • Kód UT WoS článku

    000540854800012

  • EID výsledku v databázi Scopus

    2-s2.0-85083746018