FLUORIMETRICKÁ DETEKCE ESTERÁS JAKO NÁSTROJ PRO ROZPOZNÁNÍ JEDNOTLIVÝCH BUNĚK TABÁKU A SMRKU

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F62156489%3A43210%2F05%3A00086866" target="_blank" >RIV/62156489:43210/05:00086866 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

FLUORIMETRICKÁ DETEKCE ESTERÁS JAKO NÁSTROJ PRO ROZPOZNÁNÍ JEDNOTLIVÝCH BUNĚK TABÁKU A SMRKU

Popis výsledku v původním jazyce

Metabolické dráhy a procesy probíhajících v živých organismech je velmi složité studovat přímo na buněčné úrovni. A proto je nezbytné vyvíjet nové analytické metody a postupy, které by umožnily detekovat různé biologicky důležité látky ve velmi nízkých koncentracích a objemech, zejména v jednotlivých buňkách. V této práci jsme optimalizovali metodu pro analýzu rostlinných esterás založenou na fluorimetrické detekci produktu enzymatické hydrolýzy fluorescein diacetátu a získaný detekční limit byl 17 amolve 2 ml (8,8 fM). Předpokládali jsme, že tato velmi sensitivní technika splňuje všechny požadavky pro rozpoznání počtu rostlinných buněk. A proto jsme fluorimetrické stanovení esteras použili pro analýzu rostlinných buněčných kultur (tabákové BY-2 buňkya raná somatické embrya smrku ztepilého, klonu 2/32). Detekční limit byl v případe analýzy tabákových BY-2 buněk 0.5 buňky a v případě raných somatických embryí 1.5 embrya. A navíc jsme pomocí natolik sensitivní metody byly schopni studo

Název v anglickém jazyce

Fluorimetric single cell analysis of plant esterases of tobacco and Norway spruce

Popis výsledku anglicky

Nowadays, studies of metabolic pathways and processes in living organisms cannot be easily done at the cellular level. That is why the development of a new analytical methods and approaches is needed, to allow detection of different biologically important species at very low concentrations levels and sample volumes, especially in individual cells. In the present work, we optimised the analysis of plant esterases based on fluorimetric detection of the products of the enzymatic hydrolysis of fluorescein diacetate. The detection limits was 17 amol in 2 ml (8.5 fM). We assumed that the optimised method for the determination of PE in cell extracts accomplishes all requirements for a sensitive analysis which could be usable for single cell analysis. Therefore we used this technique for analysis of plant cell cultures (BY-2 tobacco cells and early somatic embryos of Norway spruce, clone 2/32) The detection limit was 1.5 in case of analysing BY-2 tobacco cells and 0.5 in early somatic embryos.

Druh

D - Stať ve sborníku

CEP obor

ED - Fyziologie

OECD FORD obor

—

Projekt

<a href="/cs/project/GP525%2F04%2FP132" target="_blank" >GP525/04/P132: Studium obranných mechanismů rostlin při stresu způsobeném těžkými kovy</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2005

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název statě ve sborníku

MendelNet´05 Agro

ISBN

80-7157-905-X

ISSN

—

e-ISSN

—

Počet stran výsledku

1

Strana od-do

98-98

Název nakladatele

Mendelova zemědělská a lesnická univerzita v Brně

Místo vydání

Brno

Místo konání akce

MZLU Brno

Datum konání akce

29. 11. 2005

Typ akce podle státní příslušnosti

EUR - Evropská akce

Kód UT WoS článku

—