Chemoenzymatická příprava metabolitů kvercetinu pro studie biodostupnosti
Cíle projektu
Budou připraveny, purifikovány a charakterizovány sulfáty a oligosulfáty kvercetinu a jeho derivátů. Pro přípravu těchto látek využijeme především našeho materiálového a metodického zázemí, pokroči-lých separačních metod, chemoenzymatických syntéz a dostupných metod strukturní analýzy. K těmto účelům bude také proveden systematický screening genových databází a sbírky mikroorga-nismů naší laboratoře pro alternativní sulfotransferasy. Otestujeme také možnost enzymové diskrimi-nace (selektivní desulfatace) chemicky či enzymaticky připravených oligosulfátů za pomocí komerčně dostupných sulfatas. Nově připravené látky budou testovány na základní antioxidační parametry a jejich biologické aktivity budou zhodnoceny pomocí high-throughput screeningové infrastruktury CZ-Openscreen.
Klíčová slova
QuercetinMetabolitesSulfatesSulfotransferasesBiological activity
Veřejná podpora
Poskytovatel
Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy
Program
COST CZ
Veřejná soutěž
COST CZ 5 (SMSM2015LD5)
Hlavní účastníci
Mikrobiologický ústav AV ČR, v. v. i.
Druh soutěže
VS - Veřejná soutěž
Číslo smlouvy
MSMT-33315/2015-1
Alternativní jazyk
Název projektu anglicky
Chemoenzymatic preparation of the metabolites of food bioactive quercetin for bioavailability studies
Anotace anglicky
To study the bioavailability of plant food bioactives, methods and standards for the determination of their metabolites of these compounds are needed. But polyphenolic Phase II metabolites are not easy to prepare and standards not commercially available. The aim of this project is the chemoenzymatic preparation, purification and characterization of the sulfates of an important food bioactive flavonoid quercetin and its derivatives isoquercitrin, rutin and luteolin. We will use heterologously expressed sulfotransferase from Desulfitobacterium hafniense, advanced separation methods and methods of structural analysis. We will screen gene databases and our collection of microorganisms for alterna-tive sulfotransferases and test the possibility of selective desulfatation of oligosulfates using sulfa-tases. The compounds will be tested for antioxidant, antiradical, anti-lipoperoxidant and biological activity using a high-throughput screening facility in comparison with the parent compounds.
Vědní obory
Kategorie VaV
ZV - Základní výzkum
CEP - hlavní obor
CE - Biochemie
CEP - vedlejší obor
GM - Potravinářství
CEP - další vedlejší obor
FR - Farmakologie a lékárnická chemie
OECD FORD - odpovídající obory
(dle převodníku)10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
21101 - Food and beverages
30104 - Pharmacology and pharmacy
Hodnocení dokončeného projektu
Hodnocení poskytovatelem
V - Vynikající výsledky projektu (s mezinárodním významem atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
Byla optimalizována příprava a purifikace sulfátů kvercetinu a jeho derivátů za použití aryl-sulfotransferasy z Delsulfitobacterium hafniense, exprimované v E. coli. Byly získány preparáty sulfátů jednotlivých látek o čistotě 90-99%. Látky byly charakterizovány pomocí NMR a HRMS, jejich čistota zhodnocena pomocí HPLC a jejich antiradikálová aktivita pomocí série in vitro testů.
Termíny řešení
Zahájení řešení
1. 11. 2015
Ukončení řešení
31. 12. 2017
Poslední stav řešení
U - Ukončený projekt
Poslední uvolnění podpory
24. 2. 2017
Dodání dat do CEP
Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP18-MSM-LD-U/01:1
Datum dodání záznamu
12. 6. 2018
Finance
Celkové uznané náklady
1 612 tis. Kč
Výše podpory ze státního rozpočtu
1 572 tis. Kč
Ostatní veřejné zdroje financování
40 tis. Kč
Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.
0 tis. Kč
Základní informace
Uznané náklady
1 612 tis. Kč
Statní podpora
1 572 tis. Kč
97%
Poskytovatel
Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy
CEP
CE - Biochemie
Doba řešení
01. 11. 2015 - 31. 12. 2017