DNA hybridization on membrane-modified carbon electrodes
The result's identifiers
Result code in IS VaVaI
<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F68081707%3A_____%2F05%3A00031000" target="_blank" >RIV/68081707:_____/05:00031000 - isvavai.cz</a>
Result on the web
—
DOI - Digital Object Identifier
—
Alternative languages
Result language
angličtina
Original language name
DNA hybridization on membrane-modified carbon electrodes
Original language description
The DNA modified membrane electrode was prepared by casting a mixture of nitrocellulose (NC) with target DNA (tDNA) in organic solvent on glassy carbon electrode (GCE). Unlabelled PCR products (628pb) or synthetic oligodeoxynucleotides (ODNs) were used as tDNA. Biotinylated ODNs were used as hybridization probes. The hybridization events were detected via an enzyme-linked electrochemical assay involving binding of streptavidin-coupled alkaline phosphatase to the biotin labels of the probe bound to tDNA.The enzyme converted the electroinactive substrate (1-naphthyl phosphate) into electroactive product (1-naphthol) that penetrate through the NC membrane to the GCE surface and was subsequently detected using an anodic voltammetric signal.
Czech name
Hybridizace DNA na uhlíkových elektrodách modifikovaných membránou
Czech description
Membránová elektroda modifikovaná DNA byla připravena nalitím směsi nitrocelulózy (NC) s cílovou DNA (tDNA) v organickém rozpouštědle na elektrodu ze skelného uhlíku (GCE). Jako tDNA byly použity neznačené produkty polymerázové řetězové reakce nebo syntetické oligonukleotidy (ODN). ODN značené biotinem byly použity jako hybridizační sondy pro rozpoznání specifických sekvencí. Hybridizace byla detekována pomocí imunoenzymové reakce spojené s elektrochemickou detekcí zahrnující vazbu streptavidunu konjugovaného s alkalickou fosfatázou (SALP) na biotinem značené hybridizační sondy navázané na tDNA. Po hybridizaci sond a navázání SALP byla elektroda ponořena do roztoku elektroinaktiovního substrátu (1-naftyl fosfát). Enzym přemeňuje tento substrát na elektroaktivní 1-naftol, který prochází NC membránou k povrchu GCE kde poskytuje anodický signál. Optimalizovaná metoda poskytuje dobré rozlišení mezi komplementární a nespecifickou DNA a to i v případě repetitivních sekvencí.
Classification
Type
J<sub>x</sub> - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)
CEP classification
BO - Biophysics
OECD FORD branch
—
Result continuities
Project
Result was created during the realization of more than one project. More information in the Projects tab.
Continuities
P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)
Others
Publication year
2005
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data specific for result type
Name of the periodical
Analytical Letters
ISSN
0003-2719
e-ISSN
—
Volume of the periodical
38
Issue of the periodical within the volume
-
Country of publishing house
US - UNITED STATES
Number of pages
15
Pages from-to
2493-2507
UT code for WoS article
—
EID of the result in the Scopus database
—