Interakce vazebných míst nikotinického acetylcholinového receptoru
Cíle projektu
Nikotinický acetylcholinový receptor je ligandem aktivovaný iontový kanál, řízený několika allostericky spojenými vazebnými místy. Dvě vazebná místa interagují s klasickými agonisty a kompetitivními antagonisty. Nejméně dvě další vazebná místa interagujís nekompetitivními agonisty, antagonisty a modulátory a ovlivňují činnost kanálu.Cílem projektu je biofyzikálními metodami (metoda terčíkového zámku, fluorescenční mikroskopie, a molekulární biologie) studovat interakce různých vazebných míst nikotinického acetylcholinového receptoru za různých podmínek (teplota, buněčné mikrookolí, specifické bodové mutace). Budeme studovat kanály exprimované v linii COS buněk, která vytváří receptory po transfekci plasmidy kódujícími vhodné kombinace přirozených nebomutovaných podjednotek.Získané výsledky budeme porovnávat s výsledky, získanými na liniích buněk exprimujícími receptor přirozeně. Zejména budeme studovat interakce, které zahrnují přenos konformační změny mezi jednotlivými
Klíčová slova
Veřejná podpora
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
Program
Standardní projekty
Veřejná soutěž
Standardní projekty 1 (SGA02002GA-ST)
Hlavní účastníci
Fyziologický ústav AV ČR, v. v. i.
Druh soutěže
VS - Veřejná soutěž
Číslo smlouvy
—
Alternativní jazyk
Název projektu anglicky
Interaction of binding sites of nicotinic acetylcholine receptor
Anotace anglicky
The nicotinic acetylcholine receptor is a model ligand gated cationic channel which is allostericaly coupled with several interacting binding sites. Two agonist binding sites interact with classical agonists and competitive antagonists. At least two binding sites for noncompetitive agonists, antagonists and modulators influence the channel action. We will use a combination of biophysical methods (patch-clamp technique, microspectrofluorimetry and molecular biology) to investigate interaction of different binding sites of the nicotinic acetylcholine receptor under different conditions (temperature, cellular microenvironment, point mutations). Nicotinic receptors will be studied in the COS cell line expressing molecules after transfection with plasmids coding appropriate combination of natural or mutated receptor subunits. Specifically we will study the interactions involving intersubunit transfer of conformation changes - cooperativity and desensitization. Experimental results will be
Vědní obory
Kategorie VaV
ZV - Základní výzkum
CEP - hlavní obor
BO - Biofyzika
CEP - vedlejší obor
ED - Fyziologie
CEP - další vedlejší obor
FH - Neurologie, neurochirurgie, neurovědy
OECD FORD - odpovídající obory
(dle převodníku)10610 - Biophysics
30103 - Neurosciences (including psychophysiology)
30105 - Physiology (including cytology)
30210 - Clinical neurology
Hodnocení dokončeného projektu
Hodnocení poskytovatelem
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
Studovali jsme alosterické interakce na různých modelech nikotinického acetylcholinového receptoru exprimovaného v COS buňkách. Aktivaci a modulaci přirozených i mutovaných nikotinických receptorů (svalový receptor embryonálního i dospělého typu, neuroná
Termíny řešení
Zahájení řešení
1. 1. 2002
Ukončení řešení
1. 1. 2004
Poslední stav řešení
U - Ukončený projekt
Poslední uvolnění podpory
—
Dodání dat do CEP
Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP/2005/GA0/GA05GA/U/N/B:7
Datum dodání záznamu
2. 6. 2008
Finance
Celkové uznané náklady
2 543 tis. Kč
Výše podpory ze státního rozpočtu
1 280 tis. Kč
Ostatní veřejné zdroje financování
1 263 tis. Kč
Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.
0 tis. Kč
Základní informace
Uznané náklady
2 543 tis. Kč
Statní podpora
1 280 tis. Kč
50%
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
CEP
BO - Biofyzika
Doba řešení
01. 01. 2002 - 01. 01. 2004