Funkční a strukturální heterogenita membránových mikrodomén žírných buněk aktivovaných dimerizací IgE receptoru
Cíle projektu
Histamin a další mediátory alergických reakcí jsou uvolňovány z žírných buněk a bazofilů po vazbě multivalentního alergenu na komplex IgE a receptoru s vysokou afinitou pro IgE (FceRI). Prvním popsaným biochemickým krokem po agregaci FceRI je tyrosinováfosforylace subjednotek FceRI kinázou Lyn. Poté dochází k aktivaci a fosforylaci Syk kinázy a fosforylaci LAT adaptoru. Biochemická data, založená na hustotně-gradientových frakcionacích buněk lyzovaných v detergens, ukázala, že k fosforylaci FceRIdocházív membránových mikrodoménách (lipidových raftech), které jsou obohaceny o Lyn kinázu. Biochemická studia, která využívají detergens však mají svá omezení při analýze komplexních membránových lipidových struktur. V této grantové aplikaci budemetestovat hypotézu, že FceRI dimerizované pomocí bivalentních protilátek indukují topografické změny v plasmatické membráně, které odrážejí prvotní a funkčně významné změny při receptorové signalizaci. Zlatem značené protilátky budou použity pro
Klíčová slova
Veřejná podpora
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
Program
Standardní projekty
Veřejná soutěž
Standardní projekty 2 (SGA02003GA-ST)
Hlavní účastníci
Ústav molekulární genetiky AV ČR, v. v. i.
Druh soutěže
VS - Veřejná soutěž
Číslo smlouvy
—
Alternativní jazyk
Název projektu anglicky
Functional and structural heterogeneity of membrane microdomains in mast cells activated via dimerized IgE receptor
Anotace anglicky
Histamine and other mediators of allergic reactions are released from mast cells and basophils after the binding of a multivalent allergen to high-affinity IgE receptor (FceRI)-IgE complexes. The first biochemical event after FceRI aggregation istyrosinephosphorylation of FceRI subunits by Lyn kinase, followed by activation and phosphorylation of Syk kinase and phosphorylation of LAT adaptor. Biochemical data, based on density gradient fractionation of detergent-lysed cells, indicated thatFceRI was phosphorylated in membrane microdomains (lipid rafts) enriched with Lyn kinase. However, biochemical studies using lysis of the cells by detergents have their limitations in the analysis of complex membrane lipid-based structures. In thisresearch proposal we will test our hypothesis that dimerizetion of FceRI by bivalent antibodies induces topographical changes in plasma membrane which are closely related to very early and functionally significant events in FceRI signaling. Immunogold
Vědní obory
Kategorie VaV
ZV - Základní výzkum
CEP - hlavní obor
FD - Onkologie a hematologie
CEP - vedlejší obor
EC - Imunologie
CEP - další vedlejší obor
EB - Genetika a molekulární biologie
OECD FORD - odpovídající obory
(dle převodníku)10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)
10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)
10605 - Developmental biology
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
30101 - Human genetics
30102 - Immunology
30204 - Oncology
30205 - Hematology
Hodnocení dokončeného projektu
Hodnocení poskytovatelem
V - Vynikající výsledky projektu (s mezinárodním významem atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
V této studii jsme testovali naši pracovní hypotézu podle které dimerizace receptoru s vysokou afinitou pro IgE (FceRI) bivalentními monoklonálními protilátkami indukuje topografické změny v plasmatické membráně, které jsou v úzkém vztahu k velmi časným
Termíny řešení
Zahájení řešení
1. 1. 2003
Ukončení řešení
1. 1. 2005
Poslední stav řešení
U - Ukončený projekt
Poslední uvolnění podpory
—
Dodání dat do CEP
Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP06-GA0-GA-U/07:6
Datum dodání záznamu
15. 1. 2009
Finance
Celkové uznané náklady
1 995 tis. Kč
Výše podpory ze státního rozpočtu
1 995 tis. Kč
Ostatní veřejné zdroje financování
0 tis. Kč
Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.
0 tis. Kč
Základní informace
Uznané náklady
1 995 tis. Kč
Statní podpora
1 995 tis. Kč
100%
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
CEP
FD - Onkologie a hematologie
Doba řešení
01. 01. 2003 - 01. 01. 2005