Jak virus vakcínie indukuje apoptózu infikovaných makrofágů? Úloha oxidu dusnatého a cytokinů
Cíle projektu
Fagocyty monocyto/makrofágové řady mají rozhodující úlohu v nespecifické obraně proti virové infekci. Nedávno byl objeven nový mechanismus inhibice růstu DNA virů v makrofázích: tvorba oxidu dusnatého (NO). My jsme demonstrovali, že IFNy způsobuje inhibici růstu vakcinie (VV) v makrofázích na úrovni DNA syntézy a že tato inhibice koreluje se zvýšenou tvorbou NO. Dále naše výsledky ukazují, že infekce VV způsobuje apoptózu makrofágové buněčné linie J774.G8. Cílem navrhovaného projektu je stanovit roli NOa cytokinů v indukci apoptózy makrofágů při infekci VV, a to následujícími přístupy: 1. Použití inhibitorů NO-syntázy a scavengerů volných radikálů. 2. Vytvoření a použití rekombinantních VV exprimujících sense a antisense cDNA pro NO-syntázu Bcl-2 pod kontrolou časného/pozdního promotoru. 3. Použití neutralizačních protilátek proti cytokinům tvořeným aktivovanými makrofágy.
Klíčová slova
Veřejná podpora
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
Program
Standardní projekty
Veřejná soutěž
—
Hlavní účastníci
Univerzita Karlova / 1. lékařská fakulta
Druh soutěže
—
Číslo smlouvy
—
Alternativní jazyk
Název projektu anglicky
How does vaccinia virus induce macrophage apoptosis? Role of nitric oxide and cytokines
Anotace anglicky
Phagocytic cells of the monocyte/ macrophage cell lineage play a decisive role in the non-specific response to viral infection. Recently, IFNy-induced formation of nitric oxide (NO) was demonstrated as a novel mechanism in the inhibition of DNA viruses replication in macrophages. Our data show, that IFNy- mediated inhibition of viruses replication in macrophages. Our data show, that IFNy-mediated inhibition of vaccinia virus (VV) growth is due to block in DNA synthesis and correlates with increased NO production. We have also demonstrated that macrophage cell line J774,G8 undergoes apoptosis when infected by VV. The purpose od this project is to determine the role of NO and relative contribution of cytokines in VV induced apoptosis of macrophages by following approaches: l. Use of NO-synthase inhibitors and free-radical scavengers. 2. Generation and use of recombinant VV expressing sense and antisenses cDNA for NO-synthase and Bcl-2 under an early/late promoter. 3.Use of neutralising antibodies again
Vědní obory
Kategorie VaV
—
CEP - hlavní obor
EE - Mikrobiologie, virologie
CEP - vedlejší obor
EB - Genetika a molekulární biologie
CEP - další vedlejší obor
CE - Biochemie
OECD FORD - odpovídající obory
(dle převodníku)10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)
10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)
10605 - Developmental biology
10606 - Microbiology
10607 - Virology
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
30101 - Human genetics
Hodnocení dokončeného projektu
Hodnocení poskytovatelem
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
První část projektu byla splněna s tím, že byla charakterizována apoptóza makrofágů indukovaná virem vakcinie, avšak nebyla potvrzena předpokládaná úloha NO v tomto procesu. Druhá část projektu, úloha cytokinů, nebyla dosud dokončena. Původní projekt
Termíny řešení
Zahájení řešení
1. 1. 1996
Ukončení řešení
1. 1. 1998
Poslední stav řešení
U - Ukončený projekt
Poslední uvolnění podpory
—
Dodání dat do CEP
Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP/1999/GA0/GA09GA/V/6:6
Datum dodání záznamu
—
Finance
Celkové uznané náklady
2 428 tis. Kč
Výše podpory ze státního rozpočtu
1 990 tis. Kč
Ostatní veřejné zdroje financování
0 tis. Kč
Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.
0 tis. Kč
Uznané náklady
2 428 tis. Kč
Statní podpora
1 990 tis. Kč
0%
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
CEP
EE - Mikrobiologie, virologie
Doba řešení
01. 01. 1996 - 01. 01. 1998