Nová neočekávaná role ckeck-point kinázy 1: Regulace dynamiky spindlu a aktivity spindle-assembly checkpoint během meiotického zrání oocytů
Cíle projektu
Chk1 hraje klíčovou roli v regulaci normálního buněčného dělení, tím že monitoruje a brání vzniku DNA poškození během replikace. Ztráta jedné alely Chk1 vede k fenotypům jako předčasný vstup do S-fáze, akumulace DNA poškození při replikaci DNA a neschopnost blokovat předčasný vstup do mitózy, které mají za následek tumorgenezi. V současné době se farmakologická inhibice Chk1 jeví jako velmi příslibný nástroj pro nádorovou terapii. V navrhovaném grantu budou využity savčí plně narostlé oocyty, které jsoupřirozeně synchronizované v G2-fázi, ke studiu úlohy Chk1 v G2-M přechodu. Připravíme kmen myší s oocytárně specifickou delecí Chk1, který nám umožní studovat roli Chk1 v kinetice meiotického zrání in vivo. Speciální zájem bude soustředěn na dynamiku výstavby spindlu, vstup do anafáze a funkčnost spindle assembly checkpointu v Chk1 deficientních oocytech. Bude také sledována dynamická asociace Chk1 ze spindlem a kinetochory. Studie založené na mikroskopii značených živých buněk umožní definovat funkciChk1 a její interakci s kinetochory a centrosomem. Pokročilé techniky sledování živých buněk jako FRET a FRAP budou použity v těsně spolupráci se špičkovou laboratoří v této oblasti - Jan Ellenberg´s Group, EMBL Heidelberg, Německo.
Klíčová slova
Chk1spindle-assemblycheckpointtumorsuppressortaxolmeiosisspindlemigrationasymmetriccytokinesischromosomesegregation
Veřejná podpora
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
Program
Mezinárodní projekty
Veřejná soutěž
Mezinárodní projekty 3 (SGA02009GA1GC)
Hlavní účastníci
—
Druh soutěže
VS - Veřejná soutěž
Číslo smlouvy
301/09/J036
Alternativní jazyk
Název projektu anglicky
New unexpected role for check-point kinase 1: Regulation of spindle dynamics and spindle-assembly checkpoint during oocyte meiotic maturation
Anotace anglicky
Chk1 has an essential role during normal cell cycle progression by monitoring and preventing DNA damage during replication. Chk1 heterozygosity results in phenotypes that can contribute to tumorigenesis: inappropriate S phase entry, accumulation of DNA damage during replication, and failure to restrain mitotic entry. So Chk1 is now considered to be a promising target in the adjuvant tumor therapy. In the proposed grant, the mammalian fully grown oocytes, physiologically synchronized population of cellsin G2 phase, will be used to clarify a precise role of Chk1 kinase in G2-M transition. The mice with depleted CHK1 specifically only in oocytes will be generated and kinetics of in vivo meiotic maturation will be considered. The special attention will befocused to spindle dynamics, anaphase onset and to spindle assembly checkpoint functionality in Chk1 KO oocytes. Association of Chk1 with spindle and centromeres/kinetochores will be monitored. The live-cell imaging studies will follow function and molecular interactions of Chk1 with kinetochores and centrosomes. The advanced live-cell imaging experiments (FRET and FRAP) will be done in a close cooperation with Jan Ellenberg's Group, EMBL Heidelberg, Germany.
Vědní obory
Kategorie VaV
ZV - Základní výzkum
CEP - hlavní obor
EB - Genetika a molekulární biologie
CEP - vedlejší obor
FD - Onkologie a hematologie
CEP - další vedlejší obor
ED - Fyziologie
OECD FORD - odpovídající obory
(dle převodníku)10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)
10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)
10605 - Developmental biology
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
30101 - Human genetics
30105 - Physiology (including cytology)
30204 - Oncology
30205 - Hematology
Hodnocení dokončeného projektu
Hodnocení poskytovatelem
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
V rámci řešení projektu se podařilo objasnit funkci PLK1 v meiose oocytů. Byla prokázána neznámá role PLK1 v synchronizaci rozpadu jaderné membrány. Byla ustanovena fungující spolupráce s EMBL Heidelberg. Byla publikována 1 práce v zahr. časopise, 1 kap?
Termíny řešení
Zahájení řešení
1. 1. 2009
Ukončení řešení
31. 12. 2012
Poslední stav řešení
U - Ukončený projekt
Poslední uvolnění podpory
30. 3. 2012
Dodání dat do CEP
Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP13-GA0-GC-U/01:2
Datum dodání záznamu
27. 1. 2014
Finance
Celkové uznané náklady
2 647 tis. Kč
Výše podpory ze státního rozpočtu
2 647 tis. Kč
Ostatní veřejné zdroje financování
0 tis. Kč
Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.
0 tis. Kč
Uznané náklady
2 647 tis. Kč
Statní podpora
2 647 tis. Kč
0%
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
CEP
EB - Genetika a molekulární biologie
Doba řešení
01. 01. 2009 - 31. 12. 2012