xMAP technologie – multiplexní systém pro rychlý průkaz virů spojovaných s alimentárními nákazami

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00027162%3A_____%2F19%3AN0000195" target="_blank" >RIV/00027162:_____/19:N0000195 - isvavai.cz</a>

Nalezeny alternativní kódy

RIV/00216224:14310/19:00111130

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

xMAP technologie – multiplexní systém pro rychlý průkaz virů spojovaných s alimentárními nákazami

Popis výsledku v původním jazyce

XXIII. Celostátní konference virologů – Hradecké virologické dny, 22. – 23.10. 2019. Mikrobiologická bezpečnost potravin a prostředí, v němž žijeme, je v současnosti intenzivně diskutované téma. Narůstající produkce a globální trh vytváří tlak na zajištění dostatečného množství kvalitních potravin a nezávadných zdrojů pitné vody. Oproti minulosti je v této oblasti zvýšená pozornost věnována i významným virovým agens, a to jak v případě intenzivního výzkumu, tak i rutinní diagnostiky. V současnosti používané metody pro detekci přítomnosti virů však mají velkou nevýhodu v omezené možnosti vytvářet multiplexní systémy pro rychlou detekci většího počtu patogenů. Naším cílem je proto vývoj a validace nové robustní detekční metody, která nám umožní překonat zmíněné omezení současných přístupů. K vývoji takovéto metody jsme využili kombinace komerčně dostupné technologie xMAP (Luminex, Texas, USA) s multiplexní ligační reakcí. Otevřená architektura tohoto systému nám umožňuje vytvářet systémy s možností detekce až 50 různých cílů v rámci jedné reakce. Prvním krokem analýzy je reverzní transkripce, poté následuje ligace specifických sond v přítomnosti cílové sekvence. Dalším krokem je amplifikace ligovaných sond. Tyto amplikony nesou fluorescenční signál, který je v poslední fázi analýzy detekován prostřednictvím hybridizace na magnetické mikrosféry a za využití přístroje MAGPIX (Luminex, Texas, USA). V současnosti máme dostupný detekční panel zaměřený na virové patogeny, které jsou nejčastěji spojovány s případy onemocnění, kdy jsou jako zdroj identifikovány kontaminované potraviny či vodní zdroje. Tento panel je zaměřen na detekci viru hepatitidy A a E, humánních norovirů, adenovirů a rotavirů. V blízké budoucnosti je plánováno přidávání dalších původců virových onemocnění pro vytvoření dostatečně robustního systému s požadovanou citlivostí, specifitou a spolehlivostí.

Název v anglickém jazyce

xMAP Technology - Multiplex System for Fast Detection of Viruses Associated with Alimentary Infections

Popis výsledku anglicky

XXIII. National Conference of Virologists - Hradec Virological Days, 22. - 23.10. 2019. The microbiological safety of food and environment in which we live is currently an intensely discussed topic. Increasing production and the global market exert pressure on ensuring sufficient quality of food and drinking water. Compared to the past, increased attention is paid to important viral agents associated with food/water contaminations, both in the case of intensive research and in routine diagnostics. However, currently used molecular methods for detection of viruses have a major disadvantage in limited possibility to create multiplex systems for rapid detection of multiple pathogens. Therefore, our goal is to develop and validate a new robust detection method that will allow to overcome this limitation. We used a combination of commercially available xMAP technology (Luminex, Texas, USA) with a multiplex ligation reaction. The open architecture of this system allows to create detection panels with the ability to detect up to 50 different targets in one reaction. The first step of the analysis is reverse transcription, followed by ligation of specific probes in the presence of the target sequence. The next step is amplification of the ligated probes. These amplicons carry a fluorescent signal which is detected in the final step of the analysis by hybridization to magnetic microspheres and using a MAGPIX instrument (Luminex, Texas, USA). We have managed to create a system to detect 8 different targets in one reaction. It allows the simultaneous detection of hepatitis A and E viruses, human noroviruses, adenoviruses, rotaviruses and includes positive internal control of the system. Currently, we have a detection panel focused on viral pathogens that are most commonly associated with cases of contaminated food or water sources. In the near future, it is planned to add other relevant viral agents to create a truly robust system with the required sensitivity, specificity and reliability.

Druh

O - Ostatní výsledky

CEP obor

—

OECD FORD obor

10607 - Virology

Projekt

<a href="/cs/project/NV17-31921A" target="_blank" >NV17-31921A: Viry v souvislosti s alimentárními infekcemi – molekulární epidemiologie a metody rychlé detekce</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2019

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů