Facile production of Aspergillus niger a-N-acetylgalactosaminidase in yeast

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216208%3A11310%2F12%3A10104139" target="_blank" >RIV/00216208:11310/12:10104139 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

<a href="http://dx.doi.org/10.1016/j.pep.2011.09.009" target="_blank" >http://dx.doi.org/10.1016/j.pep.2011.09.009</a>

DOI - Digital Object Identifier

<a href="http://dx.doi.org/10.1016/j.pep.2011.09.009" target="_blank" >10.1016/j.pep.2011.09.009</a>

Jazyk výsledku

angličtina

Název v původním jazyce

Facile production of Aspergillus niger a-N-acetylgalactosaminidase in yeast

Popis výsledku v původním jazyce

a-N-Acetylgalactosaminidase (a-GalNAc-ase; EC.3.2.1.49) is an exoglycosidase specific for the hydrolysis of terminal a-linked N-acetylgalactosamine in various sugar chains. The cDNA corresponding to the a-GalNAc-ase gene was cloned from Aspergillus niger, sequenced, and expressed in the yeast Saccharomyces cerevisiae. The a-GalNAc-ase gene contains an open reading frame which encodes a protein of 487 amino acid residues. The molecular mass of the mature protein deduced from the amino acid sequence of this reading frame is 54 kDa. The recombinant protein was purified to apparent homogeneity and biochemically characterized (pI 4.4, KM 0.56 mmol/l for 2-nitrophenyl 2-acetamido-2-deoxy-a-D-galactopyranoside, and optimum enzyme activity was achieved at pH 2.0-2.4 and 50-55 _C). Its molecular weight was determined by analytical ultracentrifuge measurement and dynamic light scattering. Our experiments confirmed that the recombinant a-GalNAc-ase exists as two distinct species (70 and 130 kDa)

Název v anglickém jazyce

Facile production of Aspergillus niger a-N-acetylgalactosaminidase in yeast

Popis výsledku anglicky

a-N-Acetylgalactosaminidase (a-GalNAc-ase; EC.3.2.1.49) is an exoglycosidase specific for the hydrolysis of terminal a-linked N-acetylgalactosamine in various sugar chains. The cDNA corresponding to the a-GalNAc-ase gene was cloned from Aspergillus niger, sequenced, and expressed in the yeast Saccharomyces cerevisiae. The a-GalNAc-ase gene contains an open reading frame which encodes a protein of 487 amino acid residues. The molecular mass of the mature protein deduced from the amino acid sequence of this reading frame is 54 kDa. The recombinant protein was purified to apparent homogeneity and biochemically characterized (pI 4.4, KM 0.56 mmol/l for 2-nitrophenyl 2-acetamido-2-deoxy-a-D-galactopyranoside, and optimum enzyme activity was achieved at pH 2.0-2.4 and 50-55 _C). Its molecular weight was determined by analytical ultracentrifuge measurement and dynamic light scattering. Our experiments confirmed that the recombinant a-GalNAc-ase exists as two distinct species (70 and 130 kDa)

Druh

J_x - Nezařazeno - Článek v odborném periodiku (Jimp, Jsc a Jost)

CEP obor

CE - Biochemie

OECD FORD obor

—

Projekt

Výsledek vznikl pri realizaci vícero projektů. Více informací v záložce Projekty.

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)<br>S - Specificky vyzkum na vysokych skolach<br>I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Rok uplatnění

2012

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název periodika

Protein Expression and Purification

ISSN

1046-5928

e-ISSN

—

Svazek periodika

81

Číslo periodika v rámci svazku

1

Stát vydavatele periodika

US - Spojené státy americké

Počet stran výsledku

9

Strana od-do

106-114

Kód UT WoS článku

000297438800017

EID výsledku v databázi Scopus

—