Recombinant Nepenthesin II for Hydrogen/Deuterium Exchange Mass Spectrometry
Identifikátory výsledku
Kód výsledku v IS VaVaI
<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216208%3A11310%2F15%3A10315358" target="_blank" >RIV/00216208:11310/15:10315358 - isvavai.cz</a>
Nalezeny alternativní kódy
RIV/61388971:_____/15:00457205
Výsledek na webu
<a href="http://dx.doi.org/10.1021/acs.analchem.5b00831" target="_blank" >http://dx.doi.org/10.1021/acs.analchem.5b00831</a>
DOI - Digital Object Identifier
<a href="http://dx.doi.org/10.1021/acs.analchem.5b00831" target="_blank" >10.1021/acs.analchem.5b00831</a>
Alternativní jazyky
Jazyk výsledku
angličtina
Název v původním jazyce
Recombinant Nepenthesin II for Hydrogen/Deuterium Exchange Mass Spectrometry
Popis výsledku v původním jazyce
The pitcher secretions of the Nepenthes genus of carnivorous plants contain a proteolytic activity that is very useful for hydrogen/deuterium exchange mass spectrometry (HX-MS). Our efforts to reconstitute pitcher fluid activity using recombinant nepenthesin I (one of two known aspartic proteases in the fluid) revealed a partial cleavage profile and reduced enzymatic stability in certain FIX-MS applications. We produced and characterized recombinant nepenthesin II to determine if it complemented nepenthesin I in FIX-MS applications. Nepenthesin II shares many properties with nepenthesin I, such as fast digestion at reduced temperature and pH, and broad cleavage specificity, but in addition, it cleaves C-terminal to tryptophan. Neither enzyme reproducesthe C-terminal proline cleavage we observed in the natural extract. Nepenthesin II is considerably more resistant to chemical denaturants and reducing agents than nepenthesin I, and it possesses a stability profile that is similar to tha
Název v anglickém jazyce
Recombinant Nepenthesin II for Hydrogen/Deuterium Exchange Mass Spectrometry
Popis výsledku anglicky
The pitcher secretions of the Nepenthes genus of carnivorous plants contain a proteolytic activity that is very useful for hydrogen/deuterium exchange mass spectrometry (HX-MS). Our efforts to reconstitute pitcher fluid activity using recombinant nepenthesin I (one of two known aspartic proteases in the fluid) revealed a partial cleavage profile and reduced enzymatic stability in certain FIX-MS applications. We produced and characterized recombinant nepenthesin II to determine if it complemented nepenthesin I in FIX-MS applications. Nepenthesin II shares many properties with nepenthesin I, such as fast digestion at reduced temperature and pH, and broad cleavage specificity, but in addition, it cleaves C-terminal to tryptophan. Neither enzyme reproducesthe C-terminal proline cleavage we observed in the natural extract. Nepenthesin II is considerably more resistant to chemical denaturants and reducing agents than nepenthesin I, and it possesses a stability profile that is similar to tha
Klasifikace
Druh
J<sub>x</sub> - Nezařazeno - Článek v odborném periodiku (Jimp, Jsc a Jost)
CEP obor
CE - Biochemie
OECD FORD obor
—
Návaznosti výsledku
Projekt
—
Návaznosti
S - Specificky vyzkum na vysokych skolach<br>I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace
Ostatní
Rok uplatnění
2015
Kód důvěrnosti údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Údaje specifické pro druh výsledku
Název periodika
Analytical Chemistry
ISSN
0003-2700
e-ISSN
—
Svazek periodika
87
Číslo periodika v rámci svazku
13
Stát vydavatele periodika
US - Spojené státy americké
Počet stran výsledku
7
Strana od-do
6681-6687
Kód UT WoS článku
000357839700040
EID výsledku v databázi Scopus
2-s2.0-84936884852