Kit pro stanovení proteolytické aktivity kolagenázy

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F25687191%3A_____%2F20%3AN0000001" target="_blank" >RIV/25687191:_____/20:N0000001 - isvavai.cz</a>

Nalezeny alternativní kódy

RIV/00023001:_____/20:00084469

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Kit pro stanovení proteolytické aktivity kolagenázy

Popis výsledku v původním jazyce

Kolagenázy jsou enzymy patřící mezi metaloproteinázy, které rozkládají kolagen a tím se účastní rozkladu extracelulárního matrix. Kolagen je široce rozšířený strukturní protein přítomný v pojivových tkáních. Kolagenázy se využívají klinicky pro léčbu Dupuytrenovy kontraktury, Peyronieovy choroby a při léčbě špatně hojících se ran, kde se používají pro odstranění nekrotické tkáně. V současnosti jsou kolagenázy také využívány při izolaci Langerhansových 15 ostrůvků, které se dají využít k léčbě diabetu. Kolagenázy se izolují například z bakteriálního kmene Clostridium histolyticum. Tato bakterie je produkuje přirozeně do svého okolí zároveň s mnoha dalšími enzymy se schopností natrávit živočišné tkáně a tím podpořit svojí patogenezi. Účinnost kolagenázy štěpit kolagen je možné kvantifikovat hodnotou aktivity tohoto enzymu. V praxi se v laboratořích pro stanovení aktivity kolagenáz využívá metod, které můžeme rozdělit na tři hlavní směry. První směr je založen na pozorování změn ve fyzikálních vlastnostech kolagenu po degradaci jako je například viskozita. V druhém směru můžeme nalézt metody založené na specifických reakcích produktu vycházejících z enzymatických reakcí, jako jsou: hydroxyprolin, aminokyseliny, peptidy. Bohužel všechny tyto metody jsou velmi časově 25 náročné 3 až 18 h a mnohdy vyžadují práci s nebezpečnými látkami. Třetí směr zahrnuje metody, založené na využití radio nebo fluorescenčně značeném kolagenu. Běžně se kolagen značí: 14C; 2H nebo 3H; Nevýhodou je, že metody založené na radioznačení jsou bohužel závislé na nákladném vybavení pro měření a zároveň se při měření generuje 30 radioaktivní odpad. Kolagen se dá také fluorescenčně označit biotinem, nicméně tento přístup je časově náročný a také nákladný, jelikož vyžaduje separaci navázaného a nenavázaného markeru, také výtěžky jsou obecně nízké. Pro kolagenázy produkované bakterií Clostridium histolyticum byla vyvinuta metoda měření 35 aktivity založená na hydrolýze 2-furanakryloyl-L-leucylglycyl-L-prolyl-L-alaninu (FALGPA). FALGPA je hydrolyzována kolagenázou rychleji než jakýkoli jiný běžně používaný syntetický substrát a zároveň není štěpena žádnou ze známých proteináz, jako je trypsin, termolysin nebo elastáza. Samotný test je rychlý, pohodlný a citlivý.

Název v anglickém jazyce

Kit for determination of proteolytic activity of collagenase

Popis výsledku anglicky

Collagenases are enzymes belonging to metalloproteinases, which break down collagen and thereby participate in the breakdown of the extracellular matrix. Collagen is a widespread structural protein present in connective tissues. Collagenases are used clinically for the treatment of Dupuytren's contracture, Peyronie's disease and for the treatment of poorly healing wounds where they are used to remove necrotic tissue. Currently, collagenases are also used to isolate Langerhans' islets, which can be used to treat diabetes. For example, collagenases are isolated from a bacterial strain of Clostridium histolyticum. This bacterium naturally produces collagenase into the media along with many other enzymes with the ability to digest animal tissues and thereby promote its pathogenesis. The collagenase activity of cleaving collagen can be quantified by the activity value of this enzyme. Method of measuring activity of collagenase produced by Clostridium histolyticum was developed, based on the hydrolysis of 2-furanacryloyl-L-leucylglycyl-L-prolyl-L-alanine (FALGPA). FALGPA is hydrolyzed by collagenase faster than any other commonly used synthetic substrate and at the same time is not cleaved by any known proteinases such as trypsin, thermolysin or elastase. The test itself is fast, convenient and sensitive.

Druh

F_uzit - Užitný vzor

CEP obor

—

OECD FORD obor

10608 - Biochemistry and molecular biology

Projekt

<a href="/cs/project/FV20139" target="_blank" >FV20139: Biotechnologicky modifikovaná kolagenáza pro přípravu produktů moderní terapie (advanced therapy medicinal products)</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2020

Kód důvěrnosti údajů

C - Předmět řešení projektu podléhá obchodnímu tajemství (§ 504 Občanského zákoníku), ale název projektu, cíle projektu a u ukončeného nebo zastaveného projektu zhodnocení výsledku řešení projektu (údaje P03, P04, P15, P19, P29, PN8) dodané do CEP, jsou upraveny tak, aby byly zveřejnitelné.

Číslo patentu nebo vzoru

33846

Vydavatel

CZ001 -

Název vydavatele

Industrial Property Office

Místo vydání

Prague

Stát vydání

CZ - Česká republika

Datum přijetí

—

Název vlastníka

MB Pharma s.r.o.

Způsob využití

A - Výsledek využívá pouze poskytovatel

Druh možnosti využití

V - Výsledek je využíván vlastníkem