Stanovení aktivit rostlinných fosfolipas in situ s využitím fluorescenčně značených substrátů

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F60461373%3A22330%2F03%3A00008963" target="_blank" >RIV/60461373:22330/03:00008963 - isvavai.cz</a>

Nalezeny alternativní kódy

RIV/61389030:_____/03:56033125

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Stanovení aktivit rostlinných fosfolipas in situ s využitím fluorescenčně značených substrátů

Popis výsledku v původním jazyce

Fosfolipidový signální systém je jedním ze základních signálních mechanismů živočišných a rostlinných buněk. Klíčové komponenty tohoto systému tvoří především fosfolipasy. Jednotlivé fosfolipasy se dělí dle místa specifického štěpení fosfolipidu na fosfolipasy A2, C a D. Naším cílem bylo zavedení metody, která by dovolovala sledovat aktivity hlavních fosfolipas pomocí stanovení vznikajících fluorescenčně značených hydrolytických produktů a následně tak usuzovat na možné interakce mezi jednotlivými fosfolipasami tvořícími komplexní sít fosfolipidového signálního systému. Pomocí fluorescenční mikroskopie byla sledována inkorporace fluorescenčně značeného fosfatidylcholinu (BODIPY- PC) do membrán suspenzních kultur tabáku (BY-2). Dále byly připraveny fluorescenční standardy produktů jednotlivých fosfolipas pomocí komerčních preparátů. Pomocí těchto standardů byla ověřena možnost použití vysokoúčinné TLC k analýze extraktů fluorescenčních produktů. Dále byla úspěšně vyvinuta metoda analýzy

Název v anglickém jazyce

In situ determination of plant phospholipase activities using fluorescently labelled substrates

Popis výsledku anglicky

Phospholipid signalling pathway is one of the basic signalling mechanism in animal as well as plant cells. Phospholipases and phospholipids are the key components of this system. Phospholipases are divided based on the site of cleavage of the phospholipid molecules to phospholipase A2, C and D. The aim of this study was to established sophisticated method which let us to analyse products of signalling phospholipases in its entirety with one method. Phospholipid signalling pathway was studied insitu in tobacco cell suspension culture BY-2 using different types of fluorescently labelled (BODIPY) phosphatidylcholine. Incorporation of the fluorescent substrates to tobacco cell membranes was monitored by fluorescent microscopy and confirmed by pla smolysis.Fluorescent products of cleaved phosphatidylcholine were analysed by HP-TLC and newly developed HPLC methods. First the fluorescent standards of individual phospholipase products were prepared using commercial phospholipases and then use

Druh

J_x - Nezařazeno - Článek v odborném periodiku (Jimp, Jsc a Jost)

CEP obor

CE - Biochemie

OECD FORD obor

—

Projekt

<a href="/cs/project/GA522%2F03%2F0353" target="_blank" >GA522/03/0353: Mechanismy podílející se na obranné reakci řepky (Brassica napus) vůči pathogenům a vzniku indukované resistence</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2003

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název periodika

Biologické listy

ISSN

0366/486

e-ISSN

—

Svazek periodika

68

Číslo periodika v rámci svazku

3

Stát vydavatele periodika

CZ - Česká republika

Počet stran výsledku

8

Strana od-do

227-234

Kód UT WoS článku

—

EID výsledku v databázi Scopus

—