Efficient Mutagenesis Independent of Ligation (EMILI)

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F60461373%3A22330%2F14%3A43897505" target="_blank" >RIV/60461373:22330/14:43897505 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

<a href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0167701214002371" target="_blank" >http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0167701214002371</a>

DOI - Digital Object Identifier

<a href="http://dx.doi.org/10.1016/j.mimet.2014.08.003" target="_blank" >10.1016/j.mimet.2014.08.003</a>

Jazyk výsledku

angličtina

Název v původním jazyce

Efficient Mutagenesis Independent of Ligation (EMILI)

Popis výsledku v původním jazyce

Site-directed mutagenesis is one of the most widely used techniques in life sciences. Here we describe an improved and simplified method for introducing mutations at desired sites. It consists of an inverse PCR using a plasmid template and two partiallycomplementary primers. The synthesis step is followed by annealing of the PCR product's sticky ends, which are generated by exonuclease digestion. This method is fast, extremely efficient and cost-effective. It can be used to introduce large insertions and deletions, but also for multiple point mutations in a single step. To show the principle and to prove the efficiency of the method, we present a series of basic mutations (insertions, deletions, point mutations) on pUC19 plasmid DNA.

Název v anglickém jazyce

Efficient Mutagenesis Independent of Ligation (EMILI)

Popis výsledku anglicky

Site-directed mutagenesis is one of the most widely used techniques in life sciences. Here we describe an improved and simplified method for introducing mutations at desired sites. It consists of an inverse PCR using a plasmid template and two partiallycomplementary primers. The synthesis step is followed by annealing of the PCR product's sticky ends, which are generated by exonuclease digestion. This method is fast, extremely efficient and cost-effective. It can be used to introduce large insertions and deletions, but also for multiple point mutations in a single step. To show the principle and to prove the efficiency of the method, we present a series of basic mutations (insertions, deletions, point mutations) on pUC19 plasmid DNA.

Druh

J_x - Nezařazeno - Článek v odborném periodiku (Jimp, Jsc a Jost)

CEP obor

EB - Genetika a molekulární biologie

OECD FORD obor

—

Projekt

<a href="/cs/project/GAP302%2F12%2F1895" target="_blank" >GAP302/12/1895: Role retrovirového matrixového proteinu při transportu virové částice a její interakci s cytoplasmatickou membránou.</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2014

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název periodika

Journal of Microbiological Methods

ISSN

0167-7012

e-ISSN

—

Svazek periodika

106

Číslo periodika v rámci svazku

listopad 2014

Stát vydavatele periodika

NL - Nizozemsko

Počet stran výsledku

5

Strana od-do

67-71

Kód UT WoS článku

000343358200011

EID výsledku v databázi Scopus

—