Expresní vektor, pSPM-His, kódující samoštěpitelný afinitní modul odvozený z proteinu FrpC bakterie Neisseria meningitidis určený pro jednostupňovou purifikaci rekombinantních proteinů na Ni-NTA agarose

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F61388971%3A_____%2F08%3A00312749" target="_blank" >RIV/61388971:_____/08:00312749 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Expresní vektor, pSPM-His, kódující samoštěpitelný afinitní modul odvozený z proteinu FrpC bakterie Neisseria meningitidis určený pro jednostupňovou purifikaci rekombinantních proteinů na Ni-NTA agarose

Popis výsledku v původním jazyce

Expresní vektor pSPM-His nese DNA fragment kódující 250 aminokyselinových zbytků dlouhý samoštěpící modul (SPM) odvozený z proteinu FrpC bakterie Neisseria meningitidis. DNA fragment pro SPM je na 3-konci fúzován ve fázi čtení se sekvencí kódující šest histidinových zbytků (His) a na 5-konci s klonovacím místem (MCS). MCS bylo navrženo tak, aby do něj mohl být klonován gen pro libovolný rekombinantní protein ve fázi čtení se sekvencí pro SPM-His, což umožňuje produkci rekombinantního proteinu fúzovanéhok SPM-His. Po produkci fúzního proteinu a jeho zachycení k Ni-NTA agarose z buněčného lyzátu jsou kontaminující proteiny odstraněny a pomocí vápenatých iontů je indukováno SPM-zprostředkované štěpení mezi rekombinantním proteinem a SPM-His. To vede k uvolnění čistého rekombinantního proteinu z matrice, na kterou zůstává navázán pouze fúzní partner SPM-His

Název v anglickém jazyce

Expression vector, pSPM-His, coding self-processing affinity module derived from the FrpC protein of Neisseria meningitidis for single-step purification of free recombinant proteins on Ni-NTA agarose

Popis výsledku anglicky

The expression vector pSPM-His harbors a DNA fragment encoding the 250 amino acid residues long self-processing module (SPM) of the FrpC protein of Neisseria meningitidis, which is fused in frame to a sequence coding for six histidine residues (His) at the 3-terminus and to a multiple cloning sequence (MCS) at the 5-terminus. The MCS was designed for insertion of a target gene in-frame with the gene for SPM- His, thus allowing the expression of a target protein fused to SPM-His. After expression of thefusion protein and its binding to Ni-NTA agarose from a cell lysate, contaminating proteins are washed out and the SPM-mediated cleavage between recombinant protein and SPM-His is induced by calcium ions. It results in release of the free recombinant protein, while the SPM-His fusion partner remains trapped on the affinity matrix

Druh

G_funk - Funkční vzorek

CEP obor

EC - Imunologie

OECD FORD obor

—

Projekt

<a href="/cs/project/KAN200520702" target="_blank" >KAN200520702: Nanoimunosenzory pro detekci cytokinů</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)

Rok uplatnění

2008

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Interní identifikační kód produktu

pSPM-His

Číselná identifikace

—

Technické parametry

Plazmidový rekombinantní DNA konstrukt pro produkci a následnou purifikaci rekombinantních proteinů

Ekonomické parametry

Produkce rekombinantních proteinů pro imunologická stanovení v ČR a na export

Kategorie aplik. výsledku dle nákladů

—

IČO vlastníka výsledku

61388971

Název vlastníka

Mikrobiologický ústav AV ČR, v.v, Vídeňská 1083, 142 20 Praha 4, ČR

Stát vlastníka

CZ - Česká republika

Druh možnosti využití

P - Využití výsledku jiným subjektem je v některých případech možné bez nabytí licence

Požadavek na licenční poplatek

N - Poskytovatel licence na výsledek nepožaduje licenční poplatek

Adresa www stránky s výsledkem

—