Exprese ORF2 porcinního cirkoviru2 vyžaduje E. coli buňky s optimalizací kodonů

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F62157124%3A16170%2F07%3A00001431" target="_blank" >RIV/62157124:16170/07:00001431 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

angličtina

Název v původním jazyce

Expression of porcine circovirus 2 ORF2 gene requires codon optimized E. coli cells

Popis výsledku v původním jazyce

Expression and purification of whole and NLS deleted ORF2 capsid protein of porcine circovirus 2 is demonstrated in the present study. Gene coding for both protein forms were cloned into pDest17 vector and expressed in BL21 (DE3)AI cells and in BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL E. coli cells. The later cells were used to overcome difficulties with the heterologous expression of viral proteins in prokaryotic systems. Whole 30 kDa recombinant ORF2 protein was successfully expressed in BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL cells only, 3 mg of pure protein was consistently obtained per liter of bacterial culture. NLS deleted ORF2 protein was expressed in both cell types. Resulting proteins reacted with PCV2 positive swine serum in immunofluorescent test and immunoblot.

Název v anglickém jazyce

Expression of porcine circovirus 2 ORF2 gene requires codon optimized E. coli cells

Popis výsledku anglicky

Expression and purification of whole and NLS deleted ORF2 capsid protein of porcine circovirus 2 is demonstrated in the present study. Gene coding for both protein forms were cloned into pDest17 vector and expressed in BL21 (DE3)AI cells and in BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL E. coli cells. The later cells were used to overcome difficulties with the heterologous expression of viral proteins in prokaryotic systems. Whole 30 kDa recombinant ORF2 protein was successfully expressed in BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL cells only, 3 mg of pure protein was consistently obtained per liter of bacterial culture. NLS deleted ORF2 protein was expressed in both cell types. Resulting proteins reacted with PCV2 positive swine serum in immunofluorescent test and immunoblot.

Druh

J_x - Nezařazeno - Článek v odborném periodiku (Jimp, Jsc a Jost)

CEP obor

EE - Mikrobiologie, virologie

OECD FORD obor

—

Projekt

<a href="/cs/project/GA524%2F06%2F1640" target="_blank" >GA524/06/1640: Vliv neutralizačních protilátek na virémii a lokalizace neutralizačních epitopů cirkoviru prasat 2</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Rok uplatnění

2007

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název periodika

Virus Genes

ISSN

0920-8569

e-ISSN

—

Svazek periodika

34

Číslo periodika v rámci svazku

2

Stát vydavatele periodika

US - Spojené státy americké

Počet stran výsledku

6

Strana od-do

199-204

Kód UT WoS článku

—

EID výsledku v databázi Scopus

—