Optimalizace testu blastické transformace lymfocytů u pstruha duhového (Oncorhynchus mykiss)

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F62157124%3A16270%2F19%3A43877774" target="_blank" >RIV/62157124:16270/19:43877774 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

<a href="https://fvhe.vfu.cz/files/Sbornik_KMVP_2019.pdf" target="_blank" >https://fvhe.vfu.cz/files/Sbornik_KMVP_2019.pdf</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Optimalizace testu blastické transformace lymfocytů u pstruha duhového (Oncorhynchus mykiss)

Popis výsledku v původním jazyce

Reakční schopnost imunitního systému může být ověřena funkčními imunologickými testy. Po stimulaci různými mitogeny (pokeweed mitogen, konkanavalin A, fytohemaglutinin a lipopolysacharid) lymfocyty proliferují a stávají se z nich lymfoblasty. Metodologie se mezi autory liší ? v této studii byl stanoven optimální vzorek, mitogen a jeho koncentrace, typ séra a inkubační podmínky. Vzorky získané ze pstruha duhového (Oncorhynchus mykiss) zahrnovaly hlavovou ledvinu a periferní krev odebranou za použití různých antikoagulancií (heparin, EDTA). Mononukleární buňky byly izolovány centrifugací na denzitním gradientu. Izolované buňky byly inkubovány s různými mitogeny a fetálním bovinním sérem nebo pstružím sérem. Po uplynutí inkubační doby byl do buněčné suspenze přidán značený thymidin. Množství thymidinu inkorporovaného do nově vznikající DNA bylo následně změřeno přístrojem pro kapalnou scintilaci ve formě počtu záblesků za minutu (CPM). Nejvyšší hodnoty buněčné proliferace byly pozorovány u lymfocytů periferní krve (odebrané na heparin) po 7 dnech inkubace při 15 ° C. Nejlepší výsledky byly zaznamenány s pokeweed mitogenem (50 ?g/ml) a fetálním bovinním sérem.

Název v anglickém jazyce

Optimization of the lymphocyte proliferation assay in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)

Popis výsledku anglicky

The ability of the immune system to react to stimulants can be measured by functional immunological assays. After stimulation by various mitogens (including pokeweed mitogen, concanavalin A, phytohaemagglutinin and lipopolysaccharide), lymphocytes proliferate and transform into lymphoblasts. The methodology varies between different authors ? an optimal sample, mitogen and its concentration, serum type and incubation conditions were determined in this study. Samples obtained from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) included head kidney and peripheral blood collected using different anticoagulants (heparin, EDTA). Mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation. The isolated cells were incubated with different mitogens and foetal bovine serum or trout serum. After the incubation period, labeled thymidine was added to the cell suspension. The amount of thymidine incorporated into DNA was subsequently measured by a liquid scintillation counter in counts per minute (CPM). The highest levels of cell proliferation were observed with peripheral blood lymphocytes (collected using heparin) after 7 days of incubation at 15 °C. Best results were obtained with 50 ?g/ml pokeweed mitogen and foetal bovine serum.

Druh

D - Stať ve sborníku

CEP obor

—

OECD FORD obor

40301 - Veterinary science

Projekt

<a href="/cs/project/QJ1510077" target="_blank" >QJ1510077: Zvýšení a zefektivnění produkce lososovitých ryb v ČR s využitím jejich genetické identifikace.</a><br>

Návaznosti

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>S - Specificky vyzkum na vysokych skolach

Rok uplatnění

2019

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název statě ve sborníku

XXI. KONFERENCE MLADÝCH VĚDECKÝCH PRACOVNÍKŮ S MEZINÁRODNÍ ÚČASTÍ, Sborník příspěvků

ISBN

978-80-7305-820-3

ISSN

—

e-ISSN

—

Počet stran výsledku

3

Strana od-do

137-139

Název nakladatele

Veterinární a farmaceutická univerzita Brno

Místo vydání

Brno

Místo konání akce

Brno

Datum konání akce

22. 5. 2019

Typ akce podle státní příslušnosti

EUR - Evropská akce

Kód UT WoS článku

—