Technologie selekce a přípravy aptameru pro izolaci Taq DNA polymerázy

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F68378050%3A_____%2F13%3A00427021" target="_blank" >RIV/68378050:_____/13:00427021 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Technologie selekce a přípravy aptameru pro izolaci Taq DNA polymerázy

Popis výsledku v původním jazyce

Byla vyvinuta nová metoda na získání aptameru proti Taq DNA polymeráze s cílem využít tento aptamer pro nový jednodušší způsob izolace Taq DNA polymerázy. Nová metoda zahrnuje preabsorbci oligonukleotidových knihoven na irrelevantních proteinech a dále kombinaci různých přístupů pro izolaci aptamerů s využitím cílového proteinu imobilizovaného na různých podkladech. V dříve používaných opakovaných cyklech procedur SELEX se obvykle komponenty knihoven váží stále na tentýž cílový protein imobilizovaný nastejném podkladu. Pokud některý z aptamerů knihovny reaguje s imobilizujícím podkladem nebo složkami, které blokují nespecifickou absorpci, dochází k jeho nabohacení společně s požadovanými aptamery. Navrhovaná metoda tento problém odstraňuje. Nová metoda byla ověřena na vývojovém pracovišti firmy Top-Bio s.r.o. a na Oddělení signální transdukce ÚMG. Vybrané aptamery anti-Taq získané jako syntetické čisté látky byly testovány z hlediska použitelnosti izolaci Taq DNA polymerázy. Výsledky

Název v anglickém jazyce

Technology for selection and preparation of aptamer for isolation of Taq DNA polymerase

Popis výsledku anglicky

A new method was developed for obtaining aptamers specific for Taq DNA polymerase and suitable for so called hot-start PCR. The method involves preabsorbtion of oligonucleotide libraries on irrelevant proteins followed by combination of different approaches for isolation of aptamers immobilized on different carriers. In previously used repeated cycles of procedure SELEX, the components of oligonucleotide library bind on the protein immobilized to the same target structure. However, if some aptamers interacts with immobilizing matrix or components that are used to block non-specific absorption, both specific and other aptamers are enriched during SELEX procedure. Newly developed method this problem removes. New method was verified in the developmental laboratory of Top-Bio s.r.o. and in the Department of Signal Transduction at IMG. Anti-Taq aptamers obtained as synthetic substances were tested for isolation of Taq DNA polymerase. Data showed that biotinylated aptamers were suitable for

Druh

Z_tech - Ověřená technologie

CEP obor

EB - Genetika a molekulární biologie

OECD FORD obor

—

Projekt

<a href="/cs/project/TA01010436" target="_blank" >TA01010436: Nové generace DNA aptamerů</a><br>

Návaznosti

I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Rok uplatnění

2013

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Interní identifikační kód produktu

-

Číselná identifikace

—

Technické parametry

Technologie selekce a přípravy aptameru pro izolaci Taq DNA polymerázy

Ekonomické parametry

předáno pro komerční využití firmě Top-Bio s.r.o., IČ 64578895

Kategorie aplik. výsledku dle nákladů

—

IČO vlastníka výsledku

68378050

Název vlastníka

Ústav molekulární genetiky AV ČR, v. v. i.

Stát vlastníka

CZ - Česká republika

Druh možnosti využití

P - Využití výsledku jiným subjektem je v některých případech možné bez nabytí licence

Požadavek na licenční poplatek

Z - Poskytovatel licence na výsledek nepožaduje v některých případech licenční poplatek

Adresa www stránky s výsledkem

—