Studium mechanismu průniku adenylát-cyklázového toxinu přes biologické membrány

Poskytovatel

Akademie věd České republiky

Program

Granty výrazně badatelského charakteru zaměřené na oblast výzkumu rozvíjeného v současné době zejména v AV ČR

Veřejná soutěž

—

Hlavní účastníci

Mikrobiologický ústav AV ČR, v. v. i.<br>Univerzita Karlova / Přírodovědecká fakulta

Druh soutěže

VS - Veřejná soutěž

Číslo smlouvy

—

Název projektu anglicky

Investigation of the mechanism of membrane translocation of the adenylate cyclase toxin

Anotace anglicky

The adenylate cyclase toxin (ACT) paralyses a variety of cells by uncontrolled synthesis of cAMP. Penetration of ACT into cells is a rather iniwue example of spontaneous protein translocation directly across the cellular membrane. Elucidation of its molecular mechanism is of general importance for understanding the protein-membrane interactions and is the principal aim of this proposal. Here, dynamics of membrane interaction, membrane topology and oligomeric status of ACT, will be studied by fluorescence spectroscopy and immunodetection, using our set of appropriately tagged toxin mutants, bearing epitope tags, fluorescent probes and biotine labels on inique cystein residues at defined positions along the toxin molecule. Membrane interactingdomains ofACT will be defined by photoactivable lipid labelling and mass spectrometry of fragments protected from proteolysis by membrane insertion.

Kategorie VaV

—

CEP - hlavní obor

CE - Biochemie

CEP - vedlejší obor

EB - Genetika a molekulární biologie

CEP - další vedlejší obor

EE - Mikrobiologie, virologie

OECD FORD - odpovídající obory <br>(dle <a href="http://www.vyzkum.cz/storage/att/E6EF7938F0E854BAE520AC119FB22E8D/Prevodnik_oboru_Frascati.pdf">převodníku</a>)

10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)<br>10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)<br>10605 - Developmental biology<br>10606 - Microbiology<br>10607 - Virology<br>10608 - Biochemistry and molecular biology<br>10609 - Biochemical research methods<br>30101 - Human genetics

Hodnocení poskytovatelem

V - Vynikající výsledky projektu (s mezinárodním významem atd.)

Zhodnocení výsledků projektu

Byly identifikovány klíčové struktury adenylát-cyklázového toxinu odpovídající za jeho vazbu na buněčný receptor leukocytů CD11b/CD18,za inserci a translokaci AC domény do buněk,tvorbu a iontovou selektivitu membrán. kanálů a indukcí vstupu vápníku.

Zahájení řešení

1. 1. 1999

Ukončení řešení

1. 1. 2003

Poslední stav řešení

U - Ukončený projekt

Poslední uvolnění podpory

—

Důvěrnost údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Systémové označení dodávky dat

CEP/2004/AV0/AV04IA/U/N/3:2

Datum dodání záznamu

13. 10. 2004

Celkové uznané náklady

7 321 tis. Kč

Výše podpory ze státního rozpočtu

4 975 tis. Kč

Ostatní veřejné zdroje financování

1 777 tis. Kč

Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.

569 tis. Kč