In vitro kultivace kmenových buněk zubní pulpy dočasných zubů v nízkoprocentním xenogenním médiu

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00179906%3A_____%2F16%3A10323052" target="_blank" >RIV/00179906:_____/16:10323052 - isvavai.cz</a>

Nalezeny alternativní kódy

RIV/00216208:11150/16:10323052

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

In vitro kultivace kmenových buněk zubní pulpy dočasných zubů v nízkoprocentním xenogenním médiu

Popis výsledku v původním jazyce

Úvod a cíl: Na základě odklonu lidské regenerativní medicíny od xenogenních materiálů jsme zkoumali, zda je možné efektivně expandovat kmenové buňky zubní pulpy dočasných zubů (SHED) v médiu, které obsahuje minimální množství fetálního telecího séra; čímž je snížena pravděpodobnost přenosu zoonóz a vzniku prionové infekce. V roce 2011, Karbanová a spol. dokázali, že takový protokol je použitelný pro kmenové buňky stálých zubů (DPSCs). Naše hypotéza, že SHED by měly na stejné médium reagovat podobně vychází z faktu, že ač se od sebe tyto dvě populace buněk odlišují expresí povrchových znaků, sdílí místo vzniku a mají podobné niché. Metoda: Tři odlišné linie SHED, izolované pomocí enzymatické disociace, jsme kultivovali v médiu obsahujícím 2% fetálního telecího séra (FCS) až do Hayflickova limitu, čímž jsme prokázali jejich kmenovost. Následná fenotypová analýza kultivovaných SHED vykázala vysokou pozitivitu znaků mezenchymálních kmenových buněk a, tedy hodnoty charakteristické pro SHED. Poté, co jsme ověřili, že testovaná metoda izolace ani médium zásadně neovlivňilo fenotyp naší buněčné populace, jsme tyto buňky úspěšně diferencovali v následující unipotentní buněčné typy: osteoblasty, adipocyty chondrocyty, neurální, endotheliální buňky a buňky kosterní svaloviny. Výsledky: Naše data prokazují, že v porovnání s SHED kultivovaných v médiích s GREATER-THAN OR EQUAL TO 10% fetálního telecího séra, si i SHED izolované a kultivované za výše uvedených podmínek udržují vysoký proliferační potenciál, exprimují stabilní, ač o něco slabší pozitivitu povrchových znaků (v řádu 20%) a diferencují ve všechny doposud s nimi asociované buněčné typy. Závěr: Z našich výsledků vyplývá, že SHED jsou slibným a výjimečně dosažitelnou buněčnou populací, a to především pro neuroregenerativní medicínu.

Název v anglickém jazyce

In Vitro Cultivation of Dental Pulp Stem Cells from Himan Exfoliated Deciduous Teeth in Low-Xenogeneic-Serum Containing Media

Popis výsledku anglicky

Introduction, Aim: Recently, the human regenerative medicine has been departing from the use of xenogeneic materials for the possibility of zoonosis transfer and development of prion infection. We have focused our research on cultivation of dental pullp stem cells (DPSC) from human exfoliated deciduous teeth (SHED) in a medium with lowered concentration of fetal calf serum (FCS), which decreases the chances of the above mentioned negative impacts on the cultivated cell population. In 2011, Karbanova et. al. have shown that the DPSCs from impacted third molar can be viably cultured in a xenogeneic medium containing as little as 2% FCS. Our hypothesis, that SHED should react similarly to isolation and cultivation methods as DPSCs, follows from their similarities in the place of origin and their niches. Method: We have tested this hypothesis on three lineages of SHED from varying donours. The SHED were seeded onto cultivation dishes containing the test medium of 2% of FCS. The cells were then continuously expanded until the Hayflick Limit, the proof of "stemness". Following the proliferation potential test, we have examined the phenotype of the cultured undifferentiated cells which expressed high positivity of the mesenchymal stem cell (MSC) surface markers, which agrees with the characteristic SHED phenotype. After we have audited the impact of the isolation and cultivation methods, we have proceeded to test their differentiation potential by seeding the cultured SHED into various differentiation media. The SHED have successfully differentiated into all the targeted unipotent tissue and cell types, namely: osteoblasts, chondrocytes, endothelocytes, myofibroblasts and neural cells. Results: Our data shows that the SHED cultured in low-xenogeneic-serum medium, unlike the SHED cultured in high-xenogeneic-serum media, express lowered positivity of the same surface markers.

Druh

J_x - Nezařazeno - Článek v odborném periodiku (Jimp, Jsc a Jost)

CEP obor

FF - ORL, oftalmologie, stomatologie

OECD FORD obor

—

Projekt

—

Návaznosti

I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Rok uplatnění

2016

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název periodika

Česká Stomatologie a Praktické zubní lékařství

ISSN

1213-0613

e-ISSN

—

Svazek periodika

116

Číslo periodika v rámci svazku

1

Stát vydavatele periodika

CZ - Česká republika

Počet stran výsledku

9

Strana od-do

3-11

Kód UT WoS článku

—

EID výsledku v databázi Scopus

—