Izolace laktoferinu a laktoperoxidasy pomocí iontově-výměnné preparativní chromatografie

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F60461373%3A22330%2F18%3A43917186" target="_blank" >RIV/60461373:22330/18:43917186 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Izolace laktoferinu a laktoperoxidasy pomocí iontově-výměnné preparativní chromatografie

Popis výsledku v původním jazyce

Laktoferin a laktoperoxidasa patří mezi minoritní syrovátkové bílkoviny, které díky svým funkčním vlastnostem nachází uplatnění v potravinářském, farmaceutickém a kosmetickém průmyslu. Preparativní iontově – výměnná chromatografie na katexu je jednou z nejvhodnějších metod pro separaci těchto proteinů, a to především díky jejich vysokému izoelektrickému bodu. K izolaci laktoferinu a laktoperoxidasy byla použita odtučněná kyselá a sladká syrovátka, která byla před separací zahuštěna na ultrafiltrační jednotce ӒKTA flux za použití 50 kDa membrány. Separace laktoferinu a laktoperoxidasy byla prováděna pomocí preparativní iontově – výměnné chromatografie na přístroji ӒKTA pure. K separaci byla použita kolona HiScale 16 se sorbentem WorkBeads 40S. Čistota a koncentrace získaných bílkovinných frakcí byly stanoveny pomocí RP-HPLC (laktoferin) a spektrofotometrickou metodou s využitím ABTS jako substrátu (laktoperoxidasa). Získané frakce byly testovaný také pomocí SDS-PAGE elektroforézy. Během měření se podařilo získat obě bílkovinné frakce. Průměrný obsah laktoferinu získaný ze sladké syrovátky byl 1,12 mg·ml-1 o čistotě 62 % a z kyselé syrovátky 1,62 mg·ml-1 o čistotě 67 %. Obsah laktoperoxidasy byl ve frakci získané ze sladké syrovátky 1,20 mg·ml-1 a ve frakci získané z kyselé syrovátky 0,49 mg·ml-1.

Název v anglickém jazyce

Isolation of lactoferrin and lactoperoxidase by preparative ion-exchange chromatography

Popis výsledku anglicky

Lactoferrin and lactoperoxidase are minor whey proteins, which are used in the food, pharmaceutical and cosmetic industries due to their functional properties. Preparative ion-exchange chromatography on cation exchanger is one of the most suitable methods for separation of these proteins, mainly due to their high isoelectric point. For the isolation of lactoferrin and lactoperoxidase, defatted acidic and sweet whey was used. Whey was concentrated on the ultrafiltration unit ӒKTA flux using a 50 kDa membrane before separation. Separation of lactoferrin and lactoperoxidase was performed by preparative ion-exchange chromatography on the ӒKTA pure unit. HiScale 16 column with WorkBeads 40S sorbent was used for separation. The purity and concentration of the obtained proteins were determined by RP-HPLC (lactoferrin) and by spectrophotometric method using ABTS as the substrate (lactoperoxidase). The protein fractions were also tested by SDS-PAGE. Both protein fractions were obtained during the measurement. Concentration of lactoferrin isolated from the sweet whey was 1.12 mg·ml-1 (purity: 62 %) and from acidic whey was 1.62 mg·ml-1 (purity: 67 %). The lactoperoxidase concentration in the fraction obtained from sweet whey was 1.20 mg·ml-1 and in the fraction obtained from the acid whey 0.49 mg·ml-1.

Druh

D - Stať ve sborníku

CEP obor

—

OECD FORD obor

40201 - Animal and dairy science; (Animal biotechnology to be 4.4)

Projekt

—

Návaznosti

S - Specificky vyzkum na vysokych skolach

Rok uplatnění

2018

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název statě ve sborníku

Sborník Celostátní přehlídky sýrů 2018: Výsledky přehlídek a sborník příspěvků konference Mléko a sýry

ISBN

978-80-7592-030-0

ISSN

—

e-ISSN

neuvedeno

Počet stran výsledku

6

Strana od-do

195-200

Název nakladatele

Vysoká škola chemicko-technologická v Praze

Místo vydání

Praha

Místo konání akce

Praha

Datum konání akce

24. 1. 2018

Typ akce podle státní příslušnosti

CST - Celostátní akce

Kód UT WoS článku

—