Vysoce účinné kapalinová chromatografie jako nástroj pro detekci fytochelatin syntázy

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F62156489%3A43210%2F10%3A00166578" target="_blank" >RIV/62156489:43210/10:00166578 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Vysoce účinné kapalinová chromatografie jako nástroj pro detekci fytochelatin syntázy

Popis výsledku v původním jazyce

Fytochelatiny jsou sirné peptidy schopné detoxikovat těžké kovy. Jejich syntéza je katalyzována enzymem fytochelatin syntázou. V předkládané práci jsme použili vysoce účinnou kapalinovou chromatografii s elektrochemickým detektorem (HPLC-ED) k senzitivnídetekci fytochelatinu a určení aktivity fytochelatin syntetázy. Chromatografické podmínky byly optimalizovány. Aktivita fytochelatin syntázy byla sledována v homogenátu připraveném z buněk suspenzní kultury tabáku (Nicotiana tabacum cv. BY-2). Enzym bylindukován 50 uM Cd(NO3)2 a jako substrát jsme použili 100 mM redukovaný glutation (GSH). Aktivita enzymu byla určována jako ekvivalent syntetizovaného fytochelatinu po inkubační době 15 minut, který byl v reakční směsi detekován metodou HPLC-ED. Z našich výsledků vyplývá, že námi optimalizovaná metoda HPLC-ED je vhodná pro detekci nejen nízkých koncentrací fytochelatinů, ale také aktivity fytochelatin syntázy.

Název v anglickém jazyce

High performance liquid chromatographic assay for detection of phytochelatinsynthase

Popis výsledku anglicky

Phytochelatins are sulphur-rich peptides able to detoxify heavy metals. Their synthesis is catalyzed by the enzyme called phytochelatin synthase. In this study, we used high performance liquid chromatography with electrochemical detection (HPLC-ED) for sensitive determination of phytochelatins and phytochelatin synthase activity. Chromatographic conditions were optimized. Phytochelatin synthase activity was determined in homogenate prepared from cell suspension cultures of tobacco (Nicotiana tabacum cv.BY-2). The enzyme was induced by 50 uM Cd(NO3)2. As a substrate, we used 100 mM reduced glutathione (GSH). Enzyme activity was determined as the equivalent of synthesized phytochelatins after an incubation lasting 15 minutes. Phytochaltins were detectedin the reaction mixture by HPLC-ED. The results obtained show that the optimized HPLC-ED method is suitable not only for detection of low concentrations of phytochelatins, but also for determination the activity of phytochelatin synthase

Druh

J_x - Nezařazeno - Článek v odborném periodiku (Jimp, Jsc a Jost)

CEP obor

CE - Biochemie

OECD FORD obor

—

Projekt

—

Návaznosti

S - Specificky vyzkum na vysokych skolach

Rok uplatnění

2010

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název periodika

Listy cukrovarnické a řepařské : odborný časopis pro obor cukrovka-cukr-líh

ISSN

1210-3306

e-ISSN

—

Svazek periodika

126

Číslo periodika v rámci svazku

11

Stát vydavatele periodika

CZ - Česká republika

Počet stran výsledku

2

Strana od-do

—

Kód UT WoS článku

—

EID výsledku v databázi Scopus

—