Stanovení aktivity proteinu C u psů s dilatací a torzí žaludku

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F62157124%3A16170%2F20%3A43878462" target="_blank" >RIV/62157124:16170/20:43878462 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

<a href="https://www.vfu.cz/files/upload/sekretariat-prorektra-pro-vzdelavani/Sbornik_IGA_2020.pdf" target="_blank" >https://www.vfu.cz/files/upload/sekretariat-prorektra-pro-vzdelavani/Sbornik_IGA_2020.pdf</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Stanovení aktivity proteinu C u psů s dilatací a torzí žaludku

Popis výsledku v původním jazyce

Syndrom dilatace a volvulu žaludku (gastric dilatation and volvulus, GDV) je onemocnění, které postihuje především psy velkých a obřích plemen. Příčiny vzniku GDV se doposud nepodařilo plně objasnit. Při již nastalém onemocnění GDV jsou pouze dvě možnosti řešení - chirurgický zákrok nebo eutanázie pacienta. Vzhledem k akutnosti a závažnosti stavu pacientů s GDV a radikálnosti rozhodnutí o terapii je každý prognostický údaj přínosem. Protein C (PC), jeden z účastníků koagulační kaskády, je prekurzor vitamin-K-dependentní serinové proteázy aktivovaného PC, který má v organismu antitrombotický, profibrinolytický a protizánětlivý účinek.1 U lidí je PC považován za negativní protein akutní fáze2 a za negativní prognostický faktor u pacientů se sepsí.3 Také ve veterinární medicíně bylo prokázáno snížení koncentrace PC u pacientů s diseminovanou intravaskulární koagulopatií (DIC).4 Stejně jako u lidí je i u psů v sepsi nízká aktivita PC považována za negativní prognostický faktor.5 Jelikož je u pacientů s GDV vysoké riziko rozvoje DIC a septického stavu, mohlo by stanovení aktivity PC u těchto pacientů představovat cenný prognostický marker. Cílem této práce bylo zhodnotit roli PC jako prognostického markeru u pacientů s GDV a najít vztah mezi sníženou aktivitou PC a mortalitou pacientů s GDV, délkou trvání GDV, stupněm torze žaludku, výskytem nekrózy žaludku, nutností provedení splenektomie a vznikem DIC. Materiál a metodika Do studie byli zahrnuti pacienti Kliniky chorob psů a koček, Fakulty veterinárního lékařství, Veterinární a farmaceutické univerzity Brno s GDV, u nichž bylo provedeno chirurgické řešení stavu. Byly zaznamenány následující údaje: délka trvání GDV před předvedením na kliniku, stupeň torze žaludku, výskyt nekrózy žaludeční stěny, provedení splenektomie a mortalita. Odběry krve u sledovaných pacientů probíhaly v rámci rutinního předoperačního a pooperačního vyšetření, a to v časech: T0 = do půl hodiny před operací, T1 = 1. den po operaci, T2 = 2. den po operaci. Byly hodnoceny následující parametry: funkční aktivita proteinu C (PC), protrombinový čas (PT), aktivovaný parciální tromboplastinový čas (APTT), trombinový čas (TT), hladina fibrinogenu (FIB), D-dimery (DD) a počet trombocytů. Ve stanovených časech byl prováděn odběr krve do zkumavek s citrátem a EDTA. Vzorky s EDTA krví byly určené pro stanovení množství trombocytů buďto do 1 hodiny po odběru nebo po skladování při 4°C, nejpozději do 12 hodin od odběru. Vzorky s citrátovou krví byly do 1 hodiny po odběru odstředěny (5100 otáček po dobu 15 minut) a plasma byla použita pro stanovení PC, PT, APTT, TT, FIB a DD. Citrátová plasma ke stanovení PC byla zamražena při -80°C až do jejího stanovení, s maximální dobou skladování 6 měsíců. Stanovení PT, APTT, TT, FIB a DD z citrátové plasmy probíhalo buďto do 1 hodiny od odběru, a nebo po zmražení vzorku při -20°C/-80°C, nejpozději do 3 dnů od odběru. Pacienti byli hodnoceni jako pacienti s DIC v případě, že se u nich vyskytly minimálně 3 z následujících odchylek: trombocytopenie, prodloužený PT, prodloužený APTT, snížená koncentrace fibrinogenu, zvýšená koncentraci D-dimerů. Bylo provedeno statistické zhodnocení nashromážděných dat, hladina statistické významnosti byla 5 % (p?0,05). Výsledky Do studie bylo zařazeno celkem 26 pacientů, z toho 14 fen a 12 psů. Z 16 různých plemen byli nejčastěji zastoupeni německý ovčák (23,08 %) a velký švýcarský salašnický pes (11,54 %). Průměrná hmotnost pacientů byla 41,68 kg (SD 9,85) a průměrný věk 8,21 let (SD 2,52). Během sledování uhynulo 5 z 26 pacientů (19,23 %). Dva pacienti uhynuli v průběhu chirurgického zákroku, další 3 pacienti uhynuli během pooperační hospitalizace. Aktivitu proteinu C ve sledovaných časech znázorňuje Graf 1. Nebyl prokázán vztah mezi mortalitou pacientů a plemenem, pohlavím nebo věkem. Vliv výskytu nekrózy žaludku na mortalitu pacienta nebyl statisticky prokázán, přesto při analýze logistickou regresí bylo zjištěno, že výskyt nekrózy žaludku u pacientů s GDV 11x zvyšuje riziko úhynu (Graf 2). Vztah mezi sníženou aktivitou PC a mortalitou pacientů s GDV nebyl prokázán v čase T0, T1 ani T2, přesto všichni pacienti, kteří uhynuli během hospitalizace, patřili do skupiny pacientů se sníženou aktivitou PC v čase T1 (Graf 3). Nebyl prokázán vztah mezi sníženou aktivitou PC a délkou trvání GDV, stupněm torze žaludku, nekrózou žaludku a splenektomií. Dále nebyl prokázán vztah mezi sníženou aktivitou PC před operací a vznikem DIC čase T0, T1 a T2. Byla prokázána statistická významnost mezi výskytem DIC v čase T2 a mortalitou pacientů. Závěr Prognostické faktory u pacientů s GDV jsou předmětem četných studií, jako příklad můžeme uvést hodnocení C-reaktivního proteinu (CRP), high mobility group box 1 (HMGB1), laktátu, parametrů acidobazické rovnováhy, nebo myoglobinu.6-11 Nalezení spolehlivého prognostického faktoru, který by usnadnil rozhodování ohledně přínosu chirurgické terapie u konkrétního pacienta se dosud nepodařilo. Prozatím nejpřínosnějším parametrem stanovovaným u pacientů s GDV před operací je koncentrace laktátu v krvi, nicméně ani tento parametr nemá 100 % prediktivní hodnotu.7,8,10 Ani nám se v naší studii nepodařilo prokázat roli aktivity PC jako prognostického faktoru mortality u těchto pacientů, stejně tak se nepodařilo prokázat vztah mezi aktivitou PC a závažností GDV (délka trvání, stupeň torze žaludku, nekróza žaludku, splenektomie). Přesto se ukázalo, že všichni pacienti, kteří uhynuli během hospitalizace, patřili do skupiny pacientů se sníženou aktivitou PC v čase T1 (první den po operaci). Podobné výsledky zaznamenali také Verschoof a kol. (2015). Přestože se nezdá pravděpodobné, že by PC představoval vhodný předoperační prognostický marker u pacientů s GDV, dosavadní výsledky poukazují na to, že jeho snížená aktivita má vliv na pooperační přežívání pacientů. Do budoucna by proto bylo vhodné zhodnotit tento parametr na větším souboru pacientů.

Název v anglickém jazyce

Protein C activity in dogs with gastric dilatation and volvulus

Popis výsledku anglicky

Gastric dilatation and volvulus (GDV) is a disease affecting mainly large and giant breeds of dogs. Causes of GDV are still not fully understood. There are only two treatment options in dogs with ongoing GDV - surgical treatment or euthanasia. Due to acuteness and severity of patient´s condition and the need for radical decision in therapeutic approach, every prognostic factor is beneficial. Protein C (PC), one of the coagulant pathway participants, is a precursor of a vitamin-K-dependent serine protease activated protein C, which has antithrombotic, profibrinolytic and anti-inflammatory effects in live organisms.1 In humans PC is considered to be a negative acute phase protein2 and negative prognostic factor in septic patients.3 In veterinary medicine decreased PC levels were also demonstrated in patients with disseminated intravascular coagulopathy (DIC).4 In dogs with sepsis, same as in humans, low PC activity is considered to be a negative prognostic factor.5 Because of high risk of DIC and sepsis development in patients with GDV, assessment of PC activity might represent a valuable prognostic marker in such patients. The aim of the study was to evaluate a role of PC as a prognostic marker in patients with GDV and to find an association between decreased PC activity and mortality in patients with GDV, duration of clinical signs, degree of stomach torsion, gastric necrosis occurrence, necessity to perform a splenectomy and development of DIC in patients with GDV. Material and methods Patients enrolled to the study were patients that were presented to Small Animal Clinic, Faculty of Veterinary Medicine, University of Veterinary and Pharmaceutical Sciences Brno, in which surgical treatment of GDV was performed. Following data were recorded: duration of clinical signs before presented to the clinic, degree of stomach torsion, gastric necrosis occurrence, weather the splenectomy was performed and mortality of the patient. Blood sampling in selected patients was done within routine preoperative and postoperative examination in followed time periods: T0 = less than 30 min before the surgery, T1 = 1st day after surgery, T2 = 2nd day after surgery. Evaluated parameters were: functional protein C activity (PC), prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (APTT), thrombin time (TT), fibrinogen (FIB), D-dimers (DD) and thrombocyte count. The blood was collected into tubes with citrate and with EDTA in selected time periods. Samples with EDTA-blood were used to analyse thrombocyte count either within 1 hour after sampling or after being stored at 4°C for a maximum of 12 hours after sampling. Citrated blood samples were centrifugated within 1 hour after sampling (5100 rotations for 15 minutes) and obtained plasma was used to analyse PC, PT, APTT, TT, FIB and DD. Citrated plasma for PC analysis was frozen at -80°C before its analysis, with maximum storage time of 6 months. Analysis of PT, APTT, TT, FIB a DD from citrated plasma was performed within 1 hour after sampling or was frozen at -20°C/-80°C and was analysed within 3 days after sampling. Patients were evaluated as patients with DIC if they had at least 3 of the following alterations: thrombocytopenia, prolonged PT, prolonged APTT, low fibrinogen concentration, high DD concentration. Statistical assessment of obtained data was performed, level of statistical significance was 5% (p?0,05). Results A total of 26 patients were enrolled to the study, of which there were 14 females and 12 males. Among 16 different breeds the most represented was German Shepherd Dog (23,08%) and Bernese Mountain Dog (11,54%). Mean weight was 41,68 kg (SD 9,85) and mean age was 8,21 years (SD 2,52). Five of 26 patients (19,23%) died during the study period. Two patients died during the surgical intervention, another 3 patients died during postoperative hospitalisation. Protein C activity in selected time periods is shown in Graph 1. No association was found between mortality and breed, sex or age of the patients. Effect of gastric necrosis occurrence on mortality was not proved statistically, although when logistic regression analysis was performed we found that occurrence of gastric necrosis in patients with GDV increases risk of death 11 times (Graph 2). No association was found between decreased PC activity and mortality of patients with GDV in time periods T0, T1 nor T2, yet all the patients that died during hospitalisation were patients with decreased PC activity in T1 (Graph 3). There was no association between decreased PC activity and duration of clinical signs, degree of stomach torsion, gastric necrosis or performing splenectomy. Also, there was no association between decreased PC activity before surgery and development of DIC in times T0, T1 and T2. There was a statistically significant association between development of DIC in T2 and mortality of patients. Conclusion Prognostic factors in patients with GDV are main objective of several studies, as an example we can mention C-reactive protein (CRP), high mobility group box 1 (HMGB1), lactate, acid-base parameters or myoglobin.6-11 But a reliable prognostic marker that would facilitate the decision making of whether the surgical therapy is beneficial in particular patient is yet to be found. The most beneficial preoperative parameter in patients with GDV so far is blood lactate concentration, however not even lactate has a 100% predictive value.7,8,10 In our study we were also not able to demonstrate a role of PC activity in patients with GDV as a prognostic factor of severity of GDV (duration of clinical signs, degree of stomach torsion, gastric necrosis, splenectomy). However, we found that all the patients that died during hospitalisation were patients with decreased PC activity in T1 (1st day after surgery). Similar results were also described by Verschoof et al. (2015). Despite that PC activity does not seem to represent a suitable preoperative prognostic marker in patients with GDV, present results indicate that its decreased activity is associated with postoperative survival. It would be desirable to further evaluate this parameter in a large study population.

Druh

D - Stať ve sborníku

CEP obor

—

OECD FORD obor

40301 - Veterinary science

Projekt

—

Návaznosti

S - Specificky vyzkum na vysokych skolach

Rok uplatnění

2020

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název statě ve sborníku

Sborník příspěvků z výsledků řešení projektů IGA VFU Brno 2020

ISBN

978-80-7305-848-7

ISSN

—

e-ISSN

—

Počet stran výsledku

5

Strana od-do

21-25

Název nakladatele

Veterinární a farmaceutická univerzita Brno

Místo vydání

Brno

Místo konání akce

Brno

Datum konání akce

10. 12. 2020

Typ akce podle státní příslušnosti

CST - Celostátní akce

Kód UT WoS článku

—