Vliv koncentrace spermií a glycerolu na parametry motility epididymálních spermií po rozmrazení inseminační dávky

Kód výsledku v IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F62157124%3A16170%2F20%3A43878741" target="_blank" >RIV/62157124:16170/20:43878741 - isvavai.cz</a>

Výsledek na webu

<a href="https://www.vfu.cz/files/upload/sekretariat-prorektra-pro-vzdelavani/Sbornik_IGA_2020.pdf" target="_blank" >https://www.vfu.cz/files/upload/sekretariat-prorektra-pro-vzdelavani/Sbornik_IGA_2020.pdf</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Jazyk výsledku

čeština

Název v původním jazyce

Vliv koncentrace spermií a glycerolu na parametry motility epididymálních spermií po rozmrazení inseminační dávky

Popis výsledku v původním jazyce

V současné době je k mrazení ejakulovaných i epididymálních spermií hřebců jako základní kryoprotektivum používaný glycerol. Některé studie ukázaly, že koncentrace glycerolu vyšší jak 2,5 % však spermiím už výrazně škodí a snižují tedy kvalitu inseminačních dávek. Většina těchto studií probíhala při relativně nízké koncentraci spermií 100-200 x 106 v ml, což znamená, že takto připravené inseminační dávky se nutně skládají z více pejet (obvykle 5?10), což je nepraktické z hlediska prostoru při uchovávání i při samotné manipulaci při inseminaci klisny. Z předchozí studie autorů vyplynulo, že koncentrace glycerolu a jeho škodlivost pro spermie je úzce spojena právě s koncentrací spermií použitých při přípravě inseminační dávky, proto by bylo výhodné využívat pro mrazení vyšší koncentraci spermií. Cílem projektu bylo ověřit hypotézu, že motilita epididymálních spermií po rozmrazení je závislá na koncentraci kryoprotektiva glycerolu a koncentraci spermií, která je při mrazení použita. V projektu byly použity epididymální spermie získané retrográdním výplachem ocasu nadvarlete a ductus deferens z nadvarlat hřebců při kastracích na KCHK a v terénních podmínkách. Po výplachu byla orientačně posouzena jejich motilita pomocí světelného mikroskopu a pomocí CASA systému. Vzorky byly následně zcentrifugovány, supernatant odsát a spermie resuspendovány v ředidle tak, aby vzniklo 9 vzorků s různou koncentrací spermií (250, 500 a 1000 x 106 v ml) a různou koncentrací glycerolu (2 %, 4 % a 6 %). Jejich motilita byla posouzena pomocí CASA systému. Vzorky byly rozplněny do pejet a zamrazeny běžným postupem KCHK. Nejdříve po 5 dnech byly rozmrazeny a pomocí CASA systému byla posuzována motilita ihned po rozmrazení, a inkubaci ve vodní lázni po 60, 120 a 180 min. V naší studii jsme potvrdili naši hypotézu, a jako nejideálnější se ukázala koncentrace spermií 1000 x 106 v ml a koncentrace glycerolu 4 %.

Název v anglickém jazyce

Effect of sperm and glycerol concentration on frozen-thawed epididymal sperm motility parameters

Popis výsledku anglicky

Nowadays, glycerol is the most widely used cryoprotectant to freeze stallion ejaculated and epididymal sperms. However, some studies have shown that glycerol concentrations higher than 2.5% are already significantly harmful to sperm and thus reduce the quality of insemination doses. Most of these studies were performed at a relatively low sperm concentration of 100-200 x 106 per ml, which means that the insemination doses thus prepared necessarily consist of several straws (usually 5-10), which is impractical in terms of storage space and handling during mare insemination. The previous study of the authors showed that the concentration of glycerol and its harmfulness to sperm is closely related to the concentration of sperm used in the preparation of the insemination dose, so it would be advantageous to use a higher concentration of sperm for freezing. The project aimed to verify the hypothesis that the motility of epididymal sperm after thawing is dependent on the concentration of glycerol cryoprotectant and the concentration of sperm used in freezing. The project used epididymal sperm obtained by the retrograde flush of the epididymis tail and ductus deferens from the epididymis of stallions during castrations at KCHK and in field conditions. After rinsing, their motility was evaluated using a light microscope and a CASA system. The samples were then centrifuged, the supernatant aspirated, and the sperm resuspended in the diluent to give 9 samples with different sperm concentrations (250, 500, and 1000 x 106 in ml) and different glycerol concentrations (2%, 4%, and 6%). Their motility was evaluated again using the CASA system. The samples were filled into the straws and frozen using the standard protocol of our lab. They were thawed after 5 days at the earliest and motility was assessed using the CASA system immediately after thawing, and after incubation in a water bath for 60, 120, and 180 min. In our study, we confirmed our hypothesis and the sperm concentration of 1000 x 106 in ml and the glycerol concentration of 4% proved to be the most ideal.

Druh

D - Stať ve sborníku

CEP obor

—

OECD FORD obor

40301 - Veterinary science

Projekt

—

Návaznosti

S - Specificky vyzkum na vysokych skolach<br>I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Rok uplatnění

2020

Kód důvěrnosti údajů

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Název statě ve sborníku

Sborník příspěvků z výsledků řešení projektů IGA VFU Brno 2020

ISBN

978-80-7305-848-7

ISSN

—

e-ISSN

—

Počet stran výsledku

4

Strana od-do

42-45

Název nakladatele

Veterinární a farmaceutická univerzita Brno

Místo vydání

Brno

Místo konání akce

Brno

Datum konání akce

10. 12. 2020

Typ akce podle státní příslušnosti

CST - Celostátní akce

Kód UT WoS článku

—